Glutathion peptide: structuur, moleculaire gegevens, analysecertificaat, 750 mg flacon

Glutathion, afgekort als GSH, is een tripeptide van glutaminezuur, cysteïne en glycine.

Het werd in 1921 door Hopkins uit gist geïsoleerd en de structuur werd in 1935 door chemische synthese vastgesteld.

Het is veruit de meest gedocumenteerde kleine thiol in de biochemie, wat verklaart waarom het zoekvolume op deze naam elk synthetisch peptide in de catalogus overtreft.

De reden waarom het hier als "half een peptide" wordt beschreven, is de eerste binding. In een gewoon peptide is elk residu verbonden via de alfa-carboxylgroep.

In glutathion is het glutaminezuur verbonden met de cysteïne via de carboxylgroep van zijn zijketen, de gamma-carboxylgroep, waardoor de alfa-carboxylgroep vrij blijft.

De volledige naam is daarom gamma-L-glutamyl-L-cysteinyl-glycine, en de term "gamma" is geen versiering: het is de binding die gewone peptidasen niet verbreken en die een massaspectrometer herkent aan een karakteristiek verlies van 129 dalton.

Het tweede punt dat het onderscheidt van de rest van de catalogus is de schaal. KPV, DSIP of SS-31 worden gemaakt door vaste-fasesynthese en verkocht per milligram.

Glutathion op de schaal van 750 mg is industrieel gezien een kristallijn reagens dat wordt verkregen door fermentatie en kristallisatie in plaats van door synthese, en het certificaat is daarop afgestemd.

Alleen voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor menselijk of dierlijk gebruik.

Twee kenmerken van het molecuul bepalen het volledige certificaat.

De thiol van de cysteïne is de groep die oxideert in de lucht: twee GSH-moleculen verbinden zich via een disulfidebinding tot het dimeer GSSG, tweemaal de massa minus twee waterstofatomen.

Een flacon met het label "gereduceerd glutathion" is een flacon waarin die thiol nog vrij is, en het certificaat moet dat bewijzen.

De twee carboxylgroepen (de vrije alfa-carboxyl van glutaminezuur en de C-terminale carboxyl van glycine) maken de verbinding zuur en wateroplosbaar, en maken van het kristallijne poeder een zwitterion in plaats van een zout.

Er bevindt zich geen aromatisch residu in de keten. Bij 280 nm is de verbinding onzichtbaar; een chromatogram van glutathion wordt uitgevoerd bij 210 tot 215 nm, op de peptidebinding zelf.

Elke vermelding van glutathion geeft een van de twee volgende vormen aan, en het zijn verschillende reagentia.

• Gereduceerd glutathion (GSH), 307,3 g/mol, één vrije thiol per molecuul. Dit is wat de catalogus bevat, en wat de afkorting GSH op zich aanduidt.
• Geoxideerd glutathion (GSSG), 612,6 g/mol, twee GSH-moleculen verbonden door een disulfidebrug, geen vrije thiol. Een ander CAS-nummer, een andere massa, een ander certificaat.

De thiol is wat het onderscheid kwetsbaar maakt. GSH in vaste toestand, verzegeld en droog, blijft jarenlang gereduceerd.

GSH in oplossing, blootgesteld aan lucht bij een neutrale pH, oxideert binnen uren tot dagen naar GSSG, sneller in de aanwezigheid van sporen van metalen.

Daarom wordt de verbinding als droog poeder verkocht, is de flacon verzegeld en hoort een regel over het thiolgehalte op het certificaat: een poeder dat vocht heeft opgenomen en is begonnen te oxideren, ziet er nog steeds wit uit en weegt nog steeds 750 mg.

Het thiolgehalte wordt gemeten met het Ellman-reagens (DTNB): één vrije thiol laat één geel anion vrij dat wordt afgelezen bij 412 nm.

Bij een verse partij gereduceerd glutathion ligt de waarde op 98% of hoger van de theoretische waarde. Een waarde van 90% betekent dat een tiende van het poeder al een dimeer is.

Omdat glutathion op deze schaal een kristallijn reagens is en geen gelyofiliseerd synthetisch peptide, heeft het certificaat een andere vorm dan de certificaten van de rest van de catalogus. Zes regels zijn bepalend.

• Identiteit door massaspectrometrie. Het geprotoneerde molecuul bij m/z 308,1 [M+H]⁺, vaak met het natriumadduct bij 330,1. Bij fragmentatie geeft het karakteristieke neutrale verlies van 129 dalton (de pyroglutamylgroep) een fragment bij 179,0: dat verlies is de signatuur van de gamma-binding, en een molecuul zonder dit verlies is geen glutathion.
• Zuiverheid door reverse-phase HPLC bij 210 tot 215 nm. De verbinding is zeer polair en elueert vroeg, in een mobiele fase met weinig organisch oplosmiddel. De onzuiverheid om op te letten is GSSG, die later elueert; een waarde boven de 98% is gebruikelijk.
• Thiolgehalte volgens de Ellman-methode, zoals hierboven besproken, vermeld ten opzichte van de theorie.
• Watergehalte door Karl Fischer-titratie. Een kristallijn poeder dat geen zout is, heeft geen tegenion om rekening mee te houden, dus water is het enige dat tussen de labelmassa en de massa van de verbinding staat; minder dan 0,5% is typerend voor een droge partij.
• Chiraliteit. De twee chirale residuen zijn L-glutaminezuur en L-cysteïne; een specifieke optische rotatie op het certificaat bevestigt de L,L-verbinding.
• Partijnummer, datum, laboratoriumnaam en een foto van de gelabelde flacon. De regels die het document koppelen aan het fysieke object.

Er staat geen regel voor het netto peptidegehalte op een glutathion-certificaat, en de afwezigheid daarvan is correct: het netto peptidegehalte dient om rekening te houden met het acetaat en water van een gelyofiliseerd zout, en deze verbinding is geen van beide.

Een certificaat dat dit wel vermeldt, is gekopieerd van een ander product.

Hoe elk veld moet worden gelezen en hoe een rapportnummer kan worden gecontroleerd bij het laboratorium zelf, staat in hoe lees je een peptide COA en hoe lees je een Janoshik-testrapport.

Janoshik-rapporten worden per grootte gepubliceerd in de COA-bibliotheek zodra ze van het laboratorium binnenkomen.

Glutathion wordt aangeboden in één grootte, een flacon van 750 mg.

De schaal wordt bepaald door het molecuul: bij 307 g/mol is 750 mg gelijk aan 2,4 millimol, de hoeveelheid die een stamoplossing van normale concentratie mogelijk maakt zonder een fractie van een milligram te hoeven afwegen.

Bovendien maakt de prijs per gram van een fermentatieproduct een flacon van 10 mg zinloos.

De cataloguskaart bovenaan deze pagina toont de actuele gegevens uit de catalogus, zodat deze nooit in strijd is met de productpagina.

Glutathion is een reagens dat de catalogus in incidentele partijen op voorraad heeft in plaats van continu: tussen partijen door toont de glutathion productpagina de grootte als tijdelijk niet beschikbaar, en een bericht naar support@oxpeptides.com wordt beantwoord met de datum van de volgende partij.

Om die reden wordt hier geen prijs beloofd; de productpagina toont het actuele bedrag.

De andere niet-peptide onderzoeksverbindingen in de catalogus zijn NAD⁺ (flacons van 500 mg en 1 g, dezelfde schaalorde) en de twee mitochondriale reagentia MOTS‑c en SS-31.

Wat de prijs bij OXpeptides omvat: een verzegelde, gelabelde flacon, analyse in uitvoering, verslag wordt gepubliceerd zodra het ontvangen is, en een vervanging als het pakket verloren of beschadigd aankomt.

Verzonden vanuit de EU, traceerbaar: € 9,90, gratis vanaf € 120.

Bekijk glutathion in de catalogus →

• Temperatuur: −20 °C voor langdurige opslag; 2 tot 8 °C voor periodes van enkele weken. Het droge kristallijne poeder is veel robuuster dan een gelyofiliseerd synthetisch peptide.
• Lucht en vocht: de thiol is het kwetsbare deel. Bewaar de flacon verzegeld en in de doos; laat een koude flacon op kamertemperatuur komen voordat deze uit de verpakking wordt gehaald, zodat er geen condensatie op het glas ontstaat. Eenmaal geopend, opnieuw verzegelen onder droge omstandigheden en de flacon onmiddellijk sluiten.
• Houdbaarheid: 24 maanden voor een verzegelde flacon die zoals hierboven bewaard wordt; de datum op het label is leidend.
• In oplossing: dit is waar de verbinding verloren gaat. Een waterige oplossing bij neutrale pH oxideert binnen uren tot dagen in de lucht naar GSSG; een oplossing wordt gemaakt op het moment dat deze nodig is, koud bewaard, zuur gehouden waar de methode dit toelaat, en niet bewaard. Een oplossing die een week heeft gestaan, is een oplossing van GSSG.

Verzending bij omgevingstemperatuur gedurende enkele dagen tast het verzegelde poeder niet aan. De regels per verbinding staan in gelyofiliseerde peptiden: opslag en houdbaarheid.

Voor een laboratorium dat de kristallijne verbinding nodig heeft, beantwoordt een vermelding die de moeite waard is vijf vragen op de pagina zelf.

1. Wordt de vorm vermeld? Gereduceerd (GSH, 307,3) of geoxideerd (GSSG, 612,6). Een pagina die enkel "glutathion" schrijft en nooit vermeldt welke vorm het is, beschrijft een flacon die men niet heeft bekeken.
2. Is de massa 307,3 en het CAS 70-18-8? Elke andere combinatie is een andere verbinding of een gekopieerd informatieblad.
3. Staat er een regel over het thiolgehalte op het certificaat? Het is de enige waarde die een verse partij van de gereduceerde vorm onderscheidt van een partij die op de plank is gaan oxideren.
4. Is het certificaat afkomstig van een benoemd onafhankelijk laboratorium, met een taaknummer en verificatiesleutel die het laboratorium bevestigt, een datum en een foto van de gelabelde flacon?
5. Beschrijft de pagina alleen het reagens (structuur, massa, zuiverheidsdocumentatie, opslag), waarbij duidelijk wordt vermeld dat het alleen voor onderzoeksdoeleinden is? Een leverancier die gebruiksinstructies publiceert, is een leverancier die gemakkelijk kan worden gesloten, en het pakket tijdens transport is het risico van de koper.

De zeven-puntenmethode, inclusief hoe een hergebruikt of bewerkt certificaat eruitziet, staat in hoe controleer je een peptideleverancier. De Europa-brede checklist staat in hoe controleer je een peptideleverancier.