Glutathion peptide : structure, données moléculaires, certificat d'analyse, flacon de 750 mg

Le glutathion, abrégé GSH, est un tripeptide composé d'acide glutamique, de cystéine et de glycine.

Il a été isolé de la levure par Hopkins en 1921 et sa structure a été établie par synthèse chimique en 1935.

C'est de loin le petit thiol le plus documenté en biochimie, ce qui explique pourquoi le volume de recherche sur son nom dépasse celui de tous les peptides synthétiques du catalogue.

La raison pour laquelle il est décrit ici comme « à moitié un peptide » réside dans sa première liaison. Dans un peptide ordinaire, chaque résidu est lié par son alpha-carboxyle.

Dans le glutathion, l'acide glutamique est lié à la cystéine par le carboxyle de sa chaîne latérale, le gamma-carboxyle, ce qui laisse l'alpha-carboxyle libre.

Le nom complet est donc gamma-L-glutamyl-L-cystéinyl-glycine, et le « gamma » n'est pas une décoration : c'est la liaison que les peptidases ordinaires ne coupent pas et qu'un spectromètre de masse reconnaît par une perte caractéristique de 129 daltons.

Le second point qui le sépare du reste du catalogue est l'échelle. Le KPV, le DSIP ou le SS-31 sont fabriqués par synthèse en phase solide et vendus au milligramme.

Le glutathion à l'échelle de 750 mg est, industriellement, un réactif cristallin obtenu par fermentation et cristallisation plutôt que par synthèse, et son certificat se lit en conséquence.

Usage recherche uniquement. Pas pour usage humain ou vétérinaire.

Deux caractéristiques de la molécule portent l'ensemble du certificat.

Le thiol de la cystéine est le groupe qui s'oxyde à l'air : deux molécules de GSH s'unissent par un disulfure pour donner le dimère GSSG, soit deux fois la masse moins deux hydrogènes.

Un flacon étiqueté « glutathion réduit » est un flacon dans lequel ce thiol est encore libre, et le certificat doit le prouver.

Les deux carboxyles (l'alpha-carboxyle libre de l'acide glutamique et le carboxyle C-terminal de la glycine) rendent le composé acide et soluble dans l'eau, et font de la poudre cristalline un zwitterion plutôt qu'un sel.

Il n'y a pas de résidu aromatique dans la chaîne. À 280 nm, le composé est invisible ; un chromatogramme de glutathion est réalisé entre 210 et 215 nm, sur la liaison peptidique elle-même.

Chaque fiche de glutathion indique l'une des deux formes, et ce sont des réactifs différents.

• Glutathion réduit (GSH), 307,3 g/mol, un thiol libre par molécule. C'est ce que contient le catalogue, et ce que l'abréviation GSH désigne seule.
• Glutathion oxydé (GSSG), 612,6 g/mol, deux GSH reliés par un pont disulfure, aucun thiol libre. Un numéro CAS différent, une masse différente, un certificat différent.

Le thiol est ce qui rend la distinction fragile. Le GSH à l'état solide, scellé et sec, reste réduit pendant des années.

Le GSH en solution, exposé à l'air à pH neutre, s'oxyde en GSSG en quelques heures ou jours, plus rapidement en présence de traces de métaux.

C'est pourquoi le composé est vendu sous forme de poudre sèche, pourquoi le flacon est scellé, et pourquoi une ligne sur la teneur en thiol figure sur le certificat : une poudre qui a pris l'humidité et a commencé à s'oxyder reste blanche et pèse toujours 750 mg.

La teneur en thiol est mesurée avec le réactif d'Ellman (DTNB) : un thiol libre libère un anion jaune lu à 412 nm.

Sur un lot frais de glutathion réduit, le chiffre se situe à 98 % ou plus de la valeur théorique. Un chiffre de 90 % signifie qu'un dixième de la poudre est déjà sous forme de dimère.

Parce que le glutathion à cette échelle est un réactif cristallin et non un peptide synthétique lyophilisé, son certificat a une forme différente des certificats du reste du catalogue. Six lignes le composent.

• Identité par spectrométrie de masse. La molécule protonée à m/z 308,1 [M+H]⁺, souvent avec l'adduit de sodium à 330,1. Lors de la fragmentation, la perte neutre caractéristique de 129 daltons (le groupe pyroglutamyle) donne un fragment à 179,0 : cette perte est la signature de la liaison gamma, et une molécule sans elle n'est pas du glutathion.
• Pureté par HPLC en phase inverse à 210-215 nm. Le composé est très polaire et élue tôt, dans une phase mobile avec peu de solvant organique. L'impureté à rechercher est le GSSG, qui élue plus tard ; un chiffre supérieur à 98 % est habituel.
• Teneur en thiol par la méthode d'Ellman, discutée ci-dessus, indiquée par rapport à la théorie.
• Teneur en eau par titrage Karl Fischer. Une poudre cristalline qui n'est pas un sel n'a pas de contre-ion à prendre en compte, l'eau est donc la seule chose entre la masse de l'étiquette et la masse du composé ; un taux inférieur à 0,5 % est typique d'un lot sec.
• Chiralité. Les deux résidus chiraux sont l'acide L-glutamique et la L-cystéine ; une rotation optique spécifique sur le certificat confirme le composé L,L.
• Numéro de lot, date, nom du laboratoire et une photographie du flacon étiqueté. Les lignes qui lient le document à l'objet en main.

Il n'y a pas de ligne sur la teneur nette en peptide sur un certificat de glutathion, et son absence est correcte : la teneur nette en peptide existe pour rendre compte de l'acétate et de l'eau d'un sel lyophilisé, et ce composé n'est ni l'un ni l'autre.

Un certificat qui en affiche une a été copié d'un autre produit.

La manière de lire chaque champ et de vérifier un numéro de rapport auprès du laboratoire lui-même est expliquée dans comment lire un COA de peptide et comment lire un rapport de test Janoshik.

Les rapports Janoshik sont publiés par taille dans la bibliothèque de COA au fur et à mesure de leur réception.

Le glutathion est répertorié en une seule taille, un flacon de 750 mg.

L'échelle est fixée par la molécule : à 307 g/mol, 750 mg représentent 2,4 millimoles, la quantité qui permet de préparer une solution mère de concentration ordinaire sans peser une fraction de milligramme, et le prix au gramme d'un produit de fermentation rend un flacon de 10 mg inutile.

La fiche catalogue en haut de cette page affiche les chiffres en direct du catalogue, elle ne contredit donc jamais la page produit.

Le glutathion est un réactif que le catalogue stocke par lots occasionnels plutôt qu'en continu : entre les lots, la page produit du glutathion indique la taille comme temporairement indisponible, et un message à support@oxpeptides.com reçoit une réponse avec la date du prochain lot.

Aucun prix n'est promis ici pour cette raison ; la page produit affiche le chiffre en direct.

Les autres composés de recherche non peptidiques du catalogue sont le NAD⁺ (flacons de 500 mg et 1 g, même ordre d'échelle) et les deux réactifs mitochondriaux MOTS‑c et SS-31.

Ce que le prix inclut chez OXpeptides : un flacon scellé et étiqueté, et analyse en cours, rapport publié dès qu’il est reçu. Expédié depuis l’UE, suivi : 9,90 €, gratuit à partir de 120 €.

Voir le glutathion dans le catalogue →

• Température : −20 °C pour un stockage à long terme ; 2 à 8 °C pour des périodes de quelques semaines. La poudre cristalline sèche est beaucoup plus robuste qu'un peptide synthétique lyophilisé.
• Air et humidité : le thiol est la partie fragile. Gardez le flacon scellé et dans sa boîte ; laissez un flacon froid atteindre la température ambiante avant de le sortir de son sachet, afin qu'aucune condensation ne se forme sur le verre. Une fois ouvert, refermez dans des conditions sèches et refermez le flacon rapidement.
• Durée de conservation : 24 mois pour un flacon scellé stocké comme indiqué ci-dessus ; la date imprimée sur l'étiquette fait foi.
• En solution : c'est là que le composé se dégrade. Une solution aqueuse à pH neutre s'oxyde en GSSG en quelques heures ou jours à l'air ; une solution est préparée au moment où elle est nécessaire, conservée au froid, maintenue acide lorsque la méthode le permet, et n'est pas stockée. Une solution restée une semaine est une solution de GSSG.

L'expédition à température ambiante pendant quelques jours ne dégrade pas la poudre scellée. Les règles par composé se trouvent dans peptides lyophilisés : stockage et durée de conservation.

Le terme « glutathion » génère un quart de million de recherches par mois en Europe, et les premières pages sont des entrées d'encyclopédie, des pages de vente pour des produits qui n'ont rien à voir avec un réactif de recherche, et des résumés de revues scientifiques.

Pour un laboratoire qui a besoin du composé cristallin, la fiche qui mérite d'être lue répond à cinq questions sur la page elle-même.

1. La forme est-elle précisée ? Réduite (GSH, 307,3) ou oxydée (GSSG, 612,6). Une page qui écrit « glutathion » sans jamais préciser laquelle décrit un flacon qu'elle n'a pas examiné.
2. La masse est-elle de 307,3 et le CAS de 70-18-8 ? Toute autre paire correspond à un composé différent ou à une fiche technique copiée.
3. Y a-t-il une ligne sur la teneur en thiol sur le certificat ? C'est le seul chiffre qui distingue un lot frais de la forme réduite d'un lot qui a commencé à s'oxyder sur l'étagère.
4. Le certificat provient-il d'un laboratoire indépendant nommé, avec un numéro de tâche et une clé de vérification que le laboratoire confirme, une date et une photographie du flacon étiqueté ?
5. La page décrit-elle uniquement le réactif (structure, masse, documentation de pureté, stockage), avec la mention usage recherche uniquement clairement indiquée ? Un fournisseur qui publie du contenu sur l'utilisation est un fournisseur facile à faire fermer, et le colis en transit appartient à l'acheteur.

La méthode en sept points, incluant l'apparence d'un certificat réutilisé ou édité, se trouve dans comment vérifier un fournisseur de peptides.

La liste de contrôle pour toute l'Europe est dans où acheter des peptides de recherche en Europe.