Peptide glutatione: struttura, dati molecolari, certificato di analisi, flacone da 750 mg

Il glutatione, abbreviato in GSH, è un tripeptide composto da acido glutammico, cisteina e glicina.

Fu isolato dal lievito da Hopkins nel 1921 e la sua struttura fu stabilita mediante sintesi chimica nel 1935. È di gran lunga il piccolo tiolo più documentato in biochimica, motivo per cui il volume di ricerca sul suo nome eclissa ogni peptide sintetico in catalogo.

Il motivo per cui viene descritto qui come "metà peptide" è il primo legame. In un peptide ordinario, ogni residuo è unito tramite il suo alfa-carbossile.

Nel glutatione, l'acido glutammico è unito alla cisteina tramite il carbossile della sua catena laterale, il gamma-carbossile, che lascia libero l'alfa-carbossile.

Il nome completo è quindi gamma-L-glutammil-L-cisteinil-glicina, e il "gamma" non è un decoro: è il legame che le normali peptidasi non tagliano e che uno spettrometro di massa riconosce per una perdita caratteristica di 129 dalton.

Il secondo punto che lo separa dal resto del catalogo è la scala. KPV, DSIP o SS-31 sono prodotti mediante sintesi in fase solida e venduti al milligrammo.

Il glutatione alla scala di 750 mg è, industrialmente, un reagente cristallino ottenuto per fermentazione e cristallizzazione piuttosto che per sintesi, e il suo certificato riflette tale natura.

Solo per scopi di ricerca. Non per uso umano o veterinario.

Due caratteristiche della molecola reggono l'intero certificato.

Il tiolo della cisteina è il gruppo che si ossida all'aria: due molecole di GSH si uniscono tramite un disolfuro per dare il dimero GSSG, il doppio della massa meno due idrogeni.

Un flacone etichettato come "glutatione ridotto" è un flacone in cui quel tiolo è ancora libero, e il certificato deve provarlo.

I due carbossili (l'alfa-carbossile libero dell'acido glutammico e il carbossile C-terminale della glicina) rendono il composto acido e idrosolubile, e rendono la polvere cristallina uno zwitterione piuttosto che un sale.

Non c'è alcun residuo aromatico nella catena. A 280 nm il composto è invisibile; un cromatogramma del glutatione viene eseguito a 210-215 nm, sul legame peptidico stesso.

Ogni inserzione di glutatione dichiara una di queste due cose, e si tratta di reagenti diversi.

• Glutatione ridotto (GSH), 307,3 g/mol, un tiolo libero per molecola. Questo è ciò che contiene il catalogo e ciò che l'abbreviazione GSH designa da sola.
• Glutatione ossidato (GSSG), 612,6 g/mol, due GSH uniti da un ponte disolfuro, nessun tiolo libero. Un numero CAS diverso, una massa diversa, un certificato diverso.

Il tiolo è ciò che rende fragile la distinzione. Il GSH allo stato solido, sigillato e asciutto, rimane ridotto per anni.

Il GSH in soluzione, esposto all'aria a pH neutro, si ossida a GSSG in un arco di tempo che va da ore a giorni, più velocemente in presenza di tracce di metalli.

Questo è il motivo per cui il composto è venduto come polvere secca, perché il flacone è sigillato e perché una riga sul contenuto di tioli appartiene al certificato: una polvere che ha assorbito umidità e ha iniziato a ossidarsi appare ancora bianca e pesa ancora 750 mg.

Il contenuto di tioli viene misurato con il reagente di Ellman (DTNB): un tiolo libero rilascia un anione giallo letto a 412 nm.

Su un lotto fresco di glutatione ridotto il valore si attesta al 98 % o più del valore teorico. Un valore del 90 % significa che un decimo della polvere è già dimero.

Poiché il glutatione a questa scala è un reagente cristallino e non un peptide sintetico liofilizzato, il suo certificato ha una forma diversa dai certificati del resto del catalogo. Sei righe lo definiscono.

• Identità mediante spettrometria di massa. La molecola protonata a m/z 308,1 [M+H]⁺, spesso con l'addotto di sodio a 330,1. Alla frammentazione, la caratteristica perdita neutra di 129 dalton (il gruppo piroglutammile) produce un frammento a 179,0: quella perdita è la firma del legame gamma, e una molecola senza di essa non è glutatione.
• Purezza mediante HPLC a fase inversa a 210-215 nm. Il composto è molto polare ed eluisce precocemente, in una fase mobile con poco solvente organico. L'impurità da cercare è il GSSG, che eluisce più tardi; un valore superiore al 98 % è ordinario.
• Contenuto di tioli con il metodo di Ellman, discusso sopra, dichiarato rispetto al teorico.
• Contenuto d'acqua mediante titolazione Karl Fischer. Una polvere cristallina che non è un sale non ha controioni da contabilizzare, quindi l'acqua è l'unica cosa tra la massa dell'etichetta e la massa del composto; un valore inferiore allo 0,5 % è tipico di un lotto asciutto.
• Chiralità. I due residui chirali sono l'acido L-glutammico e la L-cisteina; una rotazione ottica specifica sul certificato conferma il composto L,L.
• Numero di lotto, data, nome del laboratorio e una fotografia del flacone etichettato. Le righe che legano il documento all'oggetto in mano.

Non c'è nessuna riga sul contenuto netto di peptide su un certificato di glutatione, e la sua assenza è corretta: il contenuto netto di peptide esiste per tenere conto dell'acetato e dell'acqua di un sale liofilizzato, e questo composto non è nessuno dei due.

Un certificato che ne riporta uno è stato copiato da un altro prodotto.

Come leggere ogni campo e come verificare un numero di rapporto presso il laboratorio stesso è spiegato in come leggere un COA di un peptide e come leggere un rapporto di prova Janoshik.

I rapporti Janoshik sono pubblicati per formato nella libreria COA man mano che arrivano dal laboratorio.

Il glutatione è elencato in un unico formato, un flacone da 750 mg.

La scala è stabilita dalla molecola: a 307 g/mol, 750 mg corrispondono a 2,4 millimoli, la quantità che permette di preparare una soluzione stock di concentrazione ordinaria senza pesare frazioni di milligrammo, e il prezzo per grammo di un prodotto da fermentazione rende inutile un flacone da 10 mg.

La scheda del catalogo in cima a questa pagina legge i dati in tempo reale dal catalogo, quindi non contraddice mai la pagina del prodotto.

Il glutatione è un reagente che il catalogo tiene in lotti occasionali piuttosto che continuamente: tra un lotto e l'altro la pagina del prodotto glutatione mostra il formato come temporaneamente non disponibile, e una mail a support@oxpeptides.com riceve risposta con la data del prossimo lotto.

Per questo motivo non viene promesso alcun prezzo qui; la pagina del prodotto riporta il dato aggiornato.

Gli altri composti di ricerca non peptidi del catalogo sono NAD⁺ (flaconi da 500 mg e 1 g, lo stesso ordine di scala) e i due reagenti mitocondriali MOTS‑c e SS-31.

Cosa include il prezzo presso OXpeptides: fiala sigillata ed etichettata, analisi in corso, rapporto pubblicato non appena viene ricevuto, e una sostituzione se il pacco arriva perso o danneggiato.

Spedito dall'UE, con tracciamento: 9,90 €, gratuito da 120 €.

Vedi il glutatione nel catalogo →

• Temperatura: −20 °C per la conservazione a lungo termine; da 2 a 8 °C per periodi di poche settimane. La polvere cristallina secca è molto più robusta di un peptide sintetico liofilizzato.
• Aria e umidità: il tiolo è la parte fragile. Mantenere il flacone sigillato e nella sua scatola; lasciare che un flacone freddo raggiunga la temperatura ambiente prima di estrarlo dalla busta, in modo che non si formi condensa sul vetro. Una volta aperto, richiudere in condizioni asciutte e chiudere prontamente il flacone.
• Durata di conservazione: 24 mesi per un flacone sigillato conservato come sopra; fa fede la data stampata sull'etichetta.
• In soluzione: è qui che il composto si degrada. Una soluzione acquosa a pH neutro si ossida a GSSG in poche ore o giorni all'aria; la soluzione va preparata al momento del bisogno, mantenuta fredda, mantenuta acida dove il metodo lo consente e non conservata. Una soluzione rimasta ferma per una settimana è una soluzione di GSSG.

La spedizione a temperatura ambiente per pochi giorni non degrada la polvere sigillata. Le regole composto per composto sono in peptidi liofilizzati: conservazione e durata.

"Glutathione" restituisce un gran numero di ricerche mensili in Europa, e le prime pagine sono voci di enciclopedia, pagine di vendita al dettaglio per prodotti che non hanno nulla a che fare con un reagente di ricerca e abstract di riviste scientifiche.

Per un laboratorio che necessita del composto cristallino, l'inserzione che vale la pena leggere risponde a cinque domande sulla pagina stessa.

1. La forma è dichiarata? Ridotta (GSH, 307,3) o ossidata (GSSG, 612,6). Una pagina che scrive "glutatione" e non specifica mai quale sia, sta descrivendo un flacone che non ha mai visto.
2. La massa è 307,3 e il CAS 70-18-8? Qualsiasi altra coppia indica un composto diverso o una scheda tecnica copiata.
3. C'è una riga sul contenuto di tioli nel certificato? È l'unico dato che distingue un lotto fresco della forma ridotta da un lotto che ha iniziato a ossidarsi sullo scaffale.
4. Il certificato proviene da un laboratorio indipendente nominato, con un numero di incarico e una chiave di verifica confermati dal laboratorio, una data e una fotografia del flacone etichettato?
5. La pagina descrive solo il reagente (struttura, massa, documentazione sulla purezza, conservazione), con la dicitura "Solo per scopi di ricerca. Non per uso umano o veterinario." chiaramente indicata? Un fornitore che pubblica contenuti sull'utilizzo è un fornitore facile da far chiudere, e il pacco in transito appartiene all'acquirente.

Il metodo in sette punti, incluso l'aspetto di un certificato riutilizzato o modificato, è in come controllare un fornitore di peptidi. La checklist per tutta Europa è in come controllare un fornitore di peptidi.