Péptido timosina alfa-1 (Tα1): secuencia, suministro, COA, tamaños

Thymosin alpha-1 (Tα1) es un péptido de 28 aminoácidos aislado por primera vez en 1977 del timo de ternera por el grupo de Allan Goldstein, que había estado fraccionando extractos tímicos durante una década.

Posteriormente resultó ser el fragmento N-terminal de una proteína mayor, protimosina alfa, y llevar un grupo acetilo en su N-terminal, una característica que importa en un certificado.

La misma secuencia se ha producido sintéticamente desde los 1980s y está licenciada en varios países bajo el nombre comercial Zadaxin.

Lo que se vende como timosina alfa-1 para investigación es el péptido acetilado idéntico de 28 residuos, fabricado por síntesis en fase sólida, purificado por HPLC preparativa y liofilizado. Uso exclusivo para investigación.

No para uso humano ni veterinario.

Tres entradas del catálogo contienen la palabra «tim osina» o «tim-», y los compradores suelen pedir una mientras se refieren a otra. Son tres objetos diferentes.

Las timosinas alfa y beta son secuencias no relacionadas que resultaron aisladas de la misma preparación del mismo tejido (fracción 5 de timosina, un extracto de timo de ternera preparado por primera vez en los años 1960), que es la única razón por la que comparten nombre.

Thymalin es la fracción cruda de la que se aislaron.

Un listado que describe timosina alfa-1 con las propiedades de TB‑500, o que asigna a Thymalin una masa molecular única, ha confundido los tres.

El péptido de siete residuos tiene su propia guía: péptido TB‑500: secuencia, COA, tamaños.

La serina N-terminal de timosina alfa-1 lleva un grupo acetilo (CH₃CO-), añadido durante la síntesis como último paso en la resina. Cambia tres cosas que informa un certificado.

• Masa. El acetilo añade 42,0 daltons. Una «timosina alfa-1» cuya masa reconstruye a 3.066,3 en lugar de 3.108,3 nunca se acetiló y es el péptido des-acetilado, una molécula distinta.
• HPLC. El péptido acetilado no tiene amina N-terminal libre, por lo que eluye ligeramente más tarde que la forma des-acetilada en fase inversa. Una acetilación incompleta aparece como un pequeño pico justo antes del principal; un lote bien fabricado lo muestra por debajo del 0,5 %.
• Estabilidad. Sin una amina libre en el N-terminal, el péptido no es sustrato de aminopeptidasas y no sufre las reacciones laterales N-terminales (formación de dicetopiperazina) que acortan la vida útil de algunas secuencias. En el estante es uno de los péptidos de su tamaño que mejor se comporta.

La secuencia no contiene metionina, cisteína ni triptófano, por lo que la oxidación no es la preocupación que es para sermorelin.

Sus nueve residuos ácidos lo hacen fuertemente higroscópico como sal de acetato, por lo que un vial sellado importa más para este péptido que para la mayoría.

Pureza HPLC: un pico principal

En HPLC de fase inversa el péptido eluye como un único pico principal; la cifra de pureza es el área de ese pico frente a todos los picos.

Por encima del 99 % es la especificación para los lotes del catálogo.

Las impurezas a buscar son el péptido des-acetilado (eluyendo justo antes), secuencias de deleción de la síntesis (una cadena que falta un residuo) y, para un péptido con tantos residuos de glutamato y aspartato, subproductos relacionados con aspartimida que eluyen cerca del pico principal.

Espectrometría de masas: 3.108,3

Un péptido de este tamaño y carga se ve por ionización por electrospray como iones multícargados, en modo negativo tan fácilmente como en positivo; el informe enumera los iones observados y la masa deconvolucionada.

Para timosina alfa-1 los valores esperados en modo positivo son aproximadamente m/z 1.037,1 para [M+3H]³⁺ y 778,1 para [M+4H]⁴⁺, ambos reconstruyendo a 3.108,3. Una masa deconvolucionada de 3.066 es la forma des-acetilada.

Contenido neto de péptido, agua, endotoxina

El contenido neto (por análisis de aminoácidos o UV) indica cuántos de los miligramos etiquetados son péptido; con solo cuatro residuos básicos para llevar contraiones de acetato, el 85-90 % es típico para esta secuencia, superior al de un péptido básico.

El agua (Karl Fischer) suele ser del 3-8 % en una torta liofilizada y sube rápido en un vial abierto de esta sal higroscópica.

La endotoxina (LAL, en UE/mg) indica si el agua y el material de vidrio del llenado estaban limpios.

Qué más debe aparecer en la página

• El nombre del laboratorio y un número de ensayo verificable (Janoshik Analytical es la referencia en este mercado).
• El número de lote, idéntico al impreso en el vial.
• La fecha del ensayo y una fotografía del vial ensayado con la etiqueta del proveedor. Un certificado de un vial del fabricante sin etiqueta no dice nada sobre el producto terminado.

Los certificados de OXpeptides se publican por lote en la biblioteca de COA y en la página del producto timosina alfa-1 a medida que cada lote regresa del laboratorio. El método campo por campo está en cómo leer un COA de péptido.

Timosina alfa-1 está en stock en un solo tamaño, 10 mg: 10 mg de un péptido de 3,1 kDa son 3,2 micromoles.

La tarjeta del catálogo en la parte superior de esta página muestra el precio actual. Se aplican descuentos por volumen a partir de dos viales (−5 % desde 2, −8 % desde 3), y el precio de suscripción se aplica a cada entrega.

Qué incluye el precio en OXpeptides: un vial sellado y etiquetado de un lote ensayado, su COA por lote y un reemplazo si el paquete llega perdido o dañado. Enviado desde Francia (UE), con seguimiento: $19, gratis desde $150.

Ver timosina alfa-1 en el catálogo →

• Temperatura: −20 °C para almacenamiento a largo plazo; un refrigerador (2 a 8 °C) durante unas semanas.
• Humedad: el punto a vigilar para este péptido. Nueve residuos ácidos hacen que la sal de acetato sea fuertemente higroscópica; mantenga el vial sellado y en su caja, y deje que un vial frío alcance temperatura ambiente antes de sacarlo de su bolsa para que no condense agua en el vidrio.
• Luz y oxígeno: ningún residuo oxidable en la secuencia; la caja cerrada habitual es suficiente.
• Vida útil: 24 meses para un vial liofilizado sellado almacenado en frío; la fecha de la etiqueta es la que rige.

Unos días de envío a temperatura ambiente no degradan el polvo sellado. Las reglas por compuesto están en péptidos liofilizados: almacenamiento y vida útil.

«Timosina alfa 1» devuelve páginas enciclopédicas, artículos de revistas y clínicas antes de devolver un proveedor de investigación.

Para un laboratorio que necesita el reactivo, el listado que importa responde a cinco preguntas en la propia página.

1. ¿Es la molécula correcta? 28 residuos, acetilado, 3,108.3 g/mol. No TB‑500 (889), no Thymalin (una mezcla).
2. ¿Hay un COA de lote de un laboratorio independiente nombrado, verificable en el sitio del laboratorio, con pureza HPLC, la masa en 3,108.3 y contenido neto de péptido?
3. ¿Muestra el COA el vial etiquetado del propio proveedor, y coincide su número de lote con el vial que recibe?
4. ¿El vial se envía desde stock nacional, con seguimiento, en unos días? El catálogo se envía desde Francia (UE) a Europa.
5. ¿La página describe solo el reactivo (secuencia, documentación de pureza, almacenamiento), con «Uso exclusivo para investigación. No para uso humano ni veterinario.» declarado claramente? Un proveedor que publica contenido de uso es un proveedor que es fácil de cerrar, y ese riesgo recae en el comprador cuyo paquete está en tránsito.

El método de siete puntos está en cómo comprobar un proveedor de péptidos; la lista de verificación para EE.UU. en dónde comprar péptidos de investigación en EE.UU..