Peptide Thymosin alpha-1 (Tα1) : séquence, conditionnement, COA, tailles

Thymosin alpha-1 (Tα1) est un peptide de 28 acides aminés isolé pour la première fois en 1977 à partir du thymus de veau par le groupe d’Allan Goldstein, qui fractionnait des extraits thymiques depuis une décennie.

Il s’est avéré plus tard être le fragment N-terminal d’une protéine plus grande, la prothymosine alpha, et porter un groupe acétyle sur son extrémité N-terminale, une caractéristique qui compte sur un certificat.

La même séquence est produite par synthèse depuis les années 1980 et est sous licence dans plusieurs pays sous le nom commercial Zadaxin.

Ce qui est vendu comme thymosine alpha-1 pour la recherche est le peptide acétylé identique de 28 résidus, obtenu par synthèse en phase solide, purifié par HPLC préparative et lyophilisé. Usage recherche uniquement.

Pas pour usage humain ou vétérinaire.

Trois entrées du catalogue portent le mot « thymosin » ou « thym- », et les acheteurs demandent régulièrement l’un en voulant dire un autre. Ce sont trois objets différents.

Les thymosines alpha et bêta sont des séquences non apparentées qui ont été isolées de la même préparation du même tissu (fraction 5 de thymosine, un extrait de thymus de veau préparé pour la première fois dans les années 1960), ce qui est la seule raison pour laquelle elles partagent un nom.

Thymalin est la fraction brute à partir de laquelle elles ont été isolées.

Une fiche qui décrit la thymosine alpha-1 avec les propriétés de TB‑500, ou qui attribue à thymalin une masse moléculaire unique, a confondu les trois.

Le peptide de sept résidus a son propre guide : Peptide TB‑500 : séquence, COA, tailles.

La sérine N-terminale de la thymosine alpha-1 porte un groupe acétyle (CH₃CO-), ajouté lors de la synthèse comme dernière étape sur la résine. Cela modifie trois éléments qu’un certificat indique.

• Masse. L’acétyle ajoute 42,0 daltons. Une « thymosine alpha-1 » dont la masse reconstruit à 3 066,3 au lieu de 3 108,3 n’a jamais été acétylée et est le peptide désacétylé, une molécule différente.
• HPLC. Le peptide acétylé n’a pas d’amine N-terminale libre, il élue donc légèrement plus tard que la forme désacétylée en phase inverse. Une acétylation incomplète apparaît comme un petit pic juste avant le principal ; un lot bien fabriqué le montre en dessous de 0,5 %.
• Stabilité. Sans amine libre à l’extrémité N-terminale, le peptide n’est pas un substrat pour les aminopeptidases et ne subit pas les réactions secondaires N-terminales (formation de dicétopipérazine) qui raccourcissent la durée de conservation de certaines séquences. Sur l’étagère, c’est l’un des peptides les mieux comportés de sa taille.

La séquence ne contient ni méthionine, ni cystéine, ni tryptophane, donc l’oxydation n’est pas le problème qu’elle est pour sermorelin.

Ses neuf résidus acides le rendent fortement hygroscopique sous forme de sel acétate, c’est pourquoi un flacon scellé compte plus pour ce peptide que pour la plupart.

Pureté HPLC : un pic principal

En HPLC en phase inverse, le peptide élue comme un pic principal unique ; le chiffre de pureté est la surface de ce pic par rapport à tous les pics.

Au-dessus de 99 % est la spécification pour les lots du catalogue.

Les impuretés à rechercher sont le peptide désacétylé (éluant juste avant), les séquences de délétion issues de la synthèse (une chaîne manquant un résidu) et, pour un peptide avec autant de résidus glutamate et aspartate, les sous-produits liés à l’aspartimide qui élue près du pic principal.

Spectrométrie de masse : 3 108,3

Un peptide de cette taille et de cette charge est vu par ionisation électrospray sous forme d’ions multi-chargés, en mode négatif aussi facilement qu’en positif ; le rapport liste les ions observés et la masse déconvoluée.

Pour la thymosine alpha-1, les valeurs attendues en mode positif sont environ m/z 1 037,1 pour [M+3H]³⁺ et 778,1 pour [M+4H]⁴⁺, les deux reconstruisant à 3 108,3. Une valeur déconvoluée de 3 066 correspond à la forme désacétylée.

Teneur nette en peptide, eau, endotoxine

La teneur nette (par analyse d’acides aminés ou UV) indique combien des milligrammes étiquetés sont du peptide ; avec seulement quatre résidus basiques pour porter les contre-ions acétate, 85 à 90 % est typique pour cette séquence, plus élevé que pour un peptide basique.

L’eau (Karl Fischer) est typiquement de 3 à 8 % dans un gâteau lyophilisé et augmente rapidement dans un flacon ouvert de ce sel hygroscopique.

L’endotoxine (LAL, en UE/mg) indique si l’eau et la verrerie du remplissage étaient propres.

Ce qui doit encore figurer sur la page

• Le nom du laboratoire et un numéro de test vérifiable (Janoshik Analytical est la référence sur ce marché).
• Le numéro de lot, identique à celui imprimé sur le flacon.
• La date du test et une photographie du flacon testé portant l’étiquette du fournisseur. Un certificat pour un flacon nu du fabricant ne dit rien sur le produit fini.

Les certificats d’OXpeptides sont publiés par lot dans la bibliothèque COA et sur la page produit thymosine alpha-1 dès que chaque lot revient du laboratoire. La méthode champ par champ figure dans comment lire un COA de peptide.

Thymosin alpha-1 est stocké dans une seule taille, 10 mg : 10 mg d’un peptide de 3,1 kDa représentent 3,2 micromoles.

La fiche du catalogue en haut de cette page indique le prix en vigueur. Des paliers de volume s’appliquent à partir de deux flacons (−5 % à partir de 2, −8 % à partir de 3), et le prix d’abonnement s’applique à chaque livraison.

Ce que comprend le prix chez OXpeptides : un flacon scellé et étiqueté d’un lot testé, son COA de lot, et un remplacement si le colis arrive perdu ou endommagé.

Expédié depuis la France (UE), suivi : 19 $, gratuit à partir de 150 $.

Voir la thymosine alpha-1 dans le catalogue →

• Température : −20 °C pour le stockage à long terme ; un réfrigérateur (2 à 8 °C) pour quelques semaines.
• Humidité : le point à surveiller pour ce peptide. Neuf résidus acides rendent le sel acétate fortement hygroscopique ; garder le flacon scellé et dans son boîte, et laisser un flacon froid atteindre la température ambiante avant qu’il ne quitte son sac afin qu’aucune eau ne se condense sur le verre.
• Lumière et oxygène : aucun résidu oxydable dans la séquence ; la boîte fermée habituelle suffit.
• Durée de conservation : 24 mois pour un flacon lyophilisé scellé stocké au froid ; la date sur l’étiquette fait foi.

Quelques jours de transport à température ambiante ne dégradent pas la poudre scellée. Les règles composées par composé figurent dans peptides lyophilisés : stockage et durée de conservation.

« Thymosin alpha 1 » renvoie d’abord des pages encyclopédiques, des articles de revues et des cliniques avant un fournisseur de recherche.

Pour un laboratoire qui a besoin du réactif, la fiche qui compte répond à cinq questions sur la page elle-même.

1. Est-ce la bonne molécule ? 28 résidus, acétylé, 3 108,3 g/mol. Pas TB‑500 (889), pas thymalin (un mélange).
2. Y a-t-il un COA de lot d’un laboratoire indépendant nommé, vérifiable sur le site du laboratoire, avec pureté HPLC, la masse à 3 108,3 et la teneur nette en peptide ?
3. Le COA montre-t-il le flacon étiqueté du fournisseur, et son numéro de lot correspond-il au flacon que vous recevez ?
4. Le flacon est-il expédié depuis un stock domestique, suivi, en quelques jours ? Le catalogue expédie depuis la France vers l’Europe.
5. La page décrit-elle uniquement le réactif (séquence, documentation de pureté, stockage), avec « usage recherche uniquement » indiqué clairement ? Un fournisseur qui publie du contenu d’usage est un fournisseur facile à fermer, et ce risque retombe sur l’acheteur dont le colis est en transit.

La méthode en sept points figure dans comment vérifier un fournisseur de peptides ; la liste de contrôle à l’échelle des États-Unis dans où acheter des peptides de recherche aux États-Unis.