Peptyd tymozyny alfa-1 (Tα1): sekwencja, sposób dostawy, COA, rozmiary

Thymosin alpha-1 (Tα1) jest peptydem składającym się z 28 aminokwasów, po raz pierwszy wyizolowanym w 1977 roku z grasicy cielęcej przez grupę Allana Goldsteina, która przez dekadę frakcjonowała ekstrakty grasicy.

Później okazało się, że jest to fragment N-końcowy większego białka, protymozyny alfa, oraz że niesie grupę acetylową na swoim N-końcu, cecha istotna na certyfikacie.

Ta sama sekwencja jest produkowana syntetycznie od 1980s i jest licencjonowana w kilku krajach pod nazwą handlową Zadaxin.

To, co jest sprzedawane jako tymozyna alfa-1 do badań, jest identycznym 28-resztkowym acetylowanym peptydem, wytworzonym metodą syntezy na fazie stałej, oczyszczonym przez preparatywną HPLC i liofilizowanym.

Wyłącznie do użytku badawczego. Nie do użytku ludzkiego ani weterynaryjnego.

Trzy pozycje katalogowe zawierają słowo "thymosin" lub "thym-", a kupujący regularnie proszą o jedną, mając na myśli inną. Są to trzy różne obiekty.

Alfa i beta tymozyny to niepowiązane sekwencje, które wyizolowano z tego samego preparatu tej samej tkanki (frakcja tymozyny 5, ekstrakt z grasicy cielęcej przygotowany po raz pierwszy w 1960s), co jest jedynym powodem, dla którego dzielą nazwę.

Thymalin to surowa frakcja, z której je wyizolowano.

Listing opisujący tymozynę alfa-1 właściwościami TB‑500 lub przypisujący thymalin pojedynczą masę cząsteczkową pomylił te trzy obiekty. Siedmiorezyduowy peptyd ma swój własny przewodnik: TB‑500 peptide: sekwencja, COA, rozmiary.

Seryna N-końcowa tymozyny alfa-1 niesie grupę acetylową (CH₃CO-), dodaną podczas syntezy jako ostatni etap na żywicy. Zmienia to trzy rzeczy raportowane przez certyfikat.

• Masa. Grupa acetylowa dodaje 42,0 daltonów. „Tymozyna alfa-1”, której masa rekonstruuje się do 3 066,3 zamiast 3 108,3, nigdy nie była acetylowana i jest peptydem des-acetylowym, inną cząsteczką.
• HPLC. Peptyd acetylowany nie ma wolnej aminy N-końcowej, więc na fazie odwróconej eluuje nieco później niż forma des-acetylowa. Niekompletna acetylacja pojawia się jako mały pik tuż przed głównym; dobrze wykonana partia pokazuje go poniżej 0,5 %.
• Trwałość. Bez wolnej aminy na N-końcu peptyd nie jest substratem dla aminopeptydaz i nie ulega reakcjom bocznym N-końcowym (tworzenie diketopiperazyny), które skracają trwałość niektórych sekwencji. Na półce jest jednym z lepiej zachowujących się peptydów swojej wielkości.

Sekwencja nie zawiera metioniny, cysteiny ani tryptofanu, więc utlenianie nie jest problemem, jakim jest dla sermoreliny.

Jej dziewięć reszt kwaśnych czyni ją silnie higroskopijną w postaci soli octanowej, dlatego szczelna fiolka ma dla tego peptydu większe znaczenie niż dla większości.

Czystość HPLC: jeden główny pik

Na HPLC fazy odwróconej peptyd eluuje jako jeden główny pik; wartość czystości to powierzchnia tego piku względem wszystkich pików.

Powyżej 99 % to specyfikacja partii katalogowych.

Zanieczyszczeniami do sprawdzenia są peptyd des-acetylowy (eluujący tuż przed), sekwencje delecyjne z syntezy (łańcuch pozbawiony jednej reszty) oraz, przy tak wielu resztach glutaminianu i asparaginianu, produkty uboczne związane z aspartymidem, które eluują blisko piku głównego.

Spektrometria mas: 3 108,3

Peptyd tej wielkości i ładunku jest widoczny w jonizacji elektrorozpylonej jako jony wielokrotnie naładowane, w trybie ujemnym równie łatwo jak dodatnim; raport wymienia zaobserwowane jony i masę zdekonwolowaną.

Dla tymozyny alfa-1 oczekiwane wartości w trybie dodatnim to w przybliżeniu m/z 1 037,1 dla [M+3H]³⁺ i 778,1 dla [M+4H]⁴⁺, obie rekonstruujące się do 3 108,3. Zdekonwolowana wartość 3 066 to forma des-acetylowa.

Zawartość netto peptydu, woda, endotoksyny

Zawartość netto (analiza aminokwasowa lub UV) informuje, ile z oznaczonych miligramów stanowi peptyd; przy zaledwie czterech resztach zasadowych przenoszących jony octanowe, 85 do 90 % jest typowe dla tej sekwencji, więcej niż dla peptydu zasadowego.

Woda (Karl Fischer) wynosi zazwyczaj 3 do 8 % w cieście liofilizowanym i szybko rośnie w otwartej fiolce tej higroskopijnej soli. Endotoksyny (LAL, w EU/mg) informują, czy woda i szkło napełniania były czyste.

Co jeszcze musi znajdować się na stronie

• Nazwa laboratorium i weryfikowalny numer badania (Janoshik Analytical to wzorzec na tym rynku).
• Numer partii, identyczny z wydrukowanym na fiolce.
• Data badania oraz zdjęcie badanej fiolki z etykietą dostawcy. Certyfikat dla gołej fiolki producenta nic nie mówi o produkcie końcowym.

Certyfikaty OXpeptides są publikowane dla każdej partii w bibliotece COA oraz na stronie produktu tymozyny alfa-1, gdy każda partia wraca z laboratorium. Metoda pole po polu znajduje się w jak odczytać COA peptydu.

Tymozyna alfa-1 jest magazynowana w jednym rozmiarze, 10 mg: 10 mg peptydu 3,1 kDa to 3,2 mikromola.

Karta katalogowa u góry tej strony podaje aktualną cenę. Obowiązują progi wolumenowe od dwóch fiolek (−5 % od 2, −8 % od 3), a cena subskrypcyjna dotyczy każdej dostawy.

Co obejmuje cena w OXpeptides: szczelna, oznakowana fiolka z przebadanej partii, jej partiami COA oraz wymiana, jeśli przesyłka zaginie lub ulegnie uszkodzeniu. Wysyłka z Francji (UE), śledzona: $19, bezpłatna od $150.

Zobacz tymozynę alfa-1 w katalogu →

• Temperatura: −20 °C do długoterminowego przechowywania; lodówka (2 do 8 °C) na kilka tygodni.
• Wilgoć: punkt wymagający uwagi przy tym peptydzie. Dziewięć reszt kwaśnych czyni sól octanową silnie higroskopijną; fiolkę należy przechowywać szczelnie i w pudełku, a zimną fiolkę doprowadzić do temperatury pokojowej przed wyjęciem z worka, aby nie skraplała się woda na szkle.
• Światło i tlen: brak utlenialnej reszty w sekwencji; zwykłe zamknięte pudełko wystarcza.
• Trwałość: 24 miesiące dla szczelnej fiolki liofilizowanej przechowywanej w chłodzie; data na etykiecie jest wiążąca.

Kilka dni wysyłki w temperaturze otoczenia nie degraduje szczelnego proszku. Zasady dla poszczególnych związków znajdują się w liofilizowane peptydy: przechowywanie i trwałość.

„Thymosin alpha 1” zwraca strony encyklopedyczne, artykuły w czasopismach i kliniki zanim zwróci dostawcę materiałów badawczych.

Dla laboratorium potrzebującego odczynnika, oferta która ma znaczenie odpowiada na pięć pytań na samej stronie.

1. Czy to właściwa cząsteczka? 28 reszt, acetylowana, 3,108.3 g/mol. Nie TB‑500 (889), nie thymalin (mieszanina).
2. Czy jest partia COA z nazwanej niezależnej laboratorium, weryfikowalna na stronie laboratorium, z czystością HPLC, masą 3,108.3 i zawartością netto peptydu?
3. Czy COA pokazuje własną oznakowaną fiolkę dostawcy, a numer partii zgadza się z fiolką, którą otrzymujesz?
4. Czy fiolka jest wysyłana z krajowego magazynu, z trackingiem, w kilka dni? Katalog jest wysyłany z Francji (UE) do Europy.
5. Czy strona opisuje wyłącznie odczynnik (sekwencja, dokumentacja czystości, przechowywanie), z wyraźnie podanym „research use only”? Dostawca publikujący treści dotyczące użycia to dostawca łatwy do zamknięcia, a ryzyko to spada na kupującego, którego paczka jest w transporcie.

Siedmiopunktowa metoda znajduje się w jak sprawdzić dostawcę peptydów; lista kontrolna dla rynku US w gdzie kupić peptydy badawcze w US.