Peptide timosina alfa-1 (Tα1): sequenza, fornitura, COA, formati

Thymosin alpha-1 (Tα1) è un peptide di 28 aminoacidi isolato per la prima volta nel 1977 dal timo di vitello dal gruppo di Allan Goldstein, che aveva frazionato estratti timici per un decennio.

Successivamente si è scoperto che è il frammento N-terminale di una proteina più grande, protimosina alfa, e che porta un gruppo acetile sul suo N-terminale, una caratteristica che conta su un certificato.

La stessa sequenza è stata prodotta sinteticamente dagli 1980s ed è autorizzata in diversi paesi con il nome commerciale Zadaxin.

Ciò che viene venduto come thymosin alpha-1 per la ricerca è il peptide acetilato identico di 28 residui, prodotto per sintesi in fase solida, purificato mediante HPLC preparativa e liofilizzato. Uso esclusivo per la ricerca.

Non per uso umano o veterinario.

Tre voci di catalogo contengono la parola "thymosin" o "thym-", e gli acquirenti chiedono regolarmente una mentre intendono un'altra. Sono tre oggetti diversi.

Le timosine alfa e beta sono sequenze non correlate che sono state isolate casualmente dalla stessa preparazione dello stesso tessuto (frazione 5 di timosina, un estratto di timo di vitello preparato per la prima volta negli anni 1960s), che è l'unica ragione per cui condividono un nome.

Thymalin è la frazione grezza da cui sono state isolate.

Un elenco che descrive thymosin alpha-1 con le proprietà di TB‑500, o che attribuisce a thymalin una singola massa molecolare, ha confuso i tre.

Il peptide di sette residui ha la sua guida: peptide TB‑500: sequenza, COA, dimensioni.

La serina N-terminale della timosina alfa-1 porta un gruppo acetilico (CH₃CO-), aggiunto durante la sintesi come ultimo passaggio sulla resina. Cambia tre cose che un certificato riporta.

• Massa. L'acetile aggiunge 42,0 dalton. Una "timosina alfa-1" la cui massa ricostruisce a 3.066,3 invece di 3.108,3 non è mai stata acetilata ed è il peptide des-acetilato, una molecola diversa.
• HPLC. Il peptide acetilato non ha ammina N-terminale libera, quindi eluisce leggermente più tardi della forma des-acetilata in fase inversa. Un'acetilazione incompleta si mostra come un piccolo picco appena prima di quello principale; un lotto ben fatto lo mostra sotto lo 0,5 %.
• Stabilità. Senza un'ammina libera all'N-terminale, il peptide non è substrato per le aminopeptidasi e non subisce le reazioni laterali N-terminali (formazione di dichetopiperazina) che accorciano la durata di conservazione di alcune sequenze. Scaffale è uno dei peptidi di quelle dimensioni che si comporta meglio.

La sequenza non contiene metionina, cisteina o triptofano, quindi l'ossidazione non è il problema che è per sermorelin.

I suoi nove residui acidi lo rendono fortemente igroscopico come sale acetato, motivo per cui un flaconcino sigillato conta di più per questo peptide che per la maggior parte.

Purezza HPLC: un picco principale

Sull'HPLC in fase inversa il peptide eluisce come un singolo picco principale; la cifra di purezza è l'area di quel picco rispetto a tutti i picchi.

Sopra il 99 % è la specifica per i lotti di catalogo.

Le impurità da cercare sono il peptide des-acetilato (eluito appena prima), le sequenze di delezione dalla sintesi (una catena mancante di un residuo) e, per un peptide con così tanti residui di glutammato e aspartato, i sottoprodotti correlati all'aspartimide che eluiscono vicino al picco principale.

Spettrometria di massa: 3.108,3

Un peptide di questa dimensione e carica è visto per ionizzazione elettrospray come ioni moltiplicati, in modalità negativa con la stessa facilità che in positiva; il rapporto elenca gli ioni osservati e la massa deconvoluta.

Per la timosina alfa-1 i valori attesi in modalità positiva sono approssimativamente m/z 1.037,1 per [M+3H]³⁺ e 778,1 per [M+4H]⁴⁺, entrambi che ricostruiscono a 3.108,3. Una deconvoluta 3.066 è la forma des-acetilata.

Contenuto netto di peptide, acqua, endotossina

Il contenuto netto (per analisi aminoacidica o UV) indica quanti dei milligrammi etichettati sono peptide; con solo quattro residui basici per portare controioni acetato, l'85-90 % è tipico per questa sequenza, superiore a un peptide basico.

L'acqua (Karl Fischer) è tipicamente 3-8 % in una torta liofilizzata e sale rapidamente in un flaconcino aperto di questo sale igroscopico.

L'endotossina (LAL, in UE/mg) indica se l'acqua e la vetreria del riempimento erano pulite.

Cos'altro deve esserci sulla pagina

• Il nome del laboratorio e un numero di test verificabile (Janoshik Analytical è il riferimento in questo mercato).
• Il numero di lotto, identico a quello stampato sul flaconcino.
• La data del test e una fotografia del flaconcino testato con l'etichetta del fornitore. Un certificato per un flaconcino del produttore nudo non dice nulla sul prodotto finito.

I certificati di OXpeptides sono pubblicati per lotto nella libreria COA e sulla pagina del prodotto timosina alfa-1 man mano che ogni lotto torna dal laboratorio. Il metodo campo per campo è in come leggere un COA di un peptide.

Timosina alfa-1 è stoccata in un solo formato, 10 mg: 10 mg di un peptide da 3,1 kDa sono 3,2 micromoli.

La scheda di catalogo in cima a questa pagina mostra il prezzo in tempo reale. Si applicano scaglioni di volume da due flaconcini (−5 % da 2, −8 % da 3), e il prezzo in abbonamento si applica a ogni consegna.

Cosa include il prezzo su OXpeptides: un flaconcino sigillato ed etichettato da un lotto testato, il suo COA di lotto e una sostituzione se il pacco arriva perso o danneggiato.

Spedito dalla Francia (UE), tracciabile: $19, gratuito da $150.

Vedi timosina alfa-1 nel catalogo →

• Temperatura: −20 °C per la conservazione a lungo termine; un frigorifero (2–8 °C) per alcune settimane.
• Umidità: il punto da osservare per questo peptide. Nove residui acidi rendono il sale acetato fortemente igroscopico; tenere il flaconcino sigillato e nella sua scatola, e lasciare che un flaconcino freddo raggiunga la temperatura ambiente prima che esca dalla sua borsa in modo che non si condensi acqua sul vetro.
• Luce e ossigeno: nessun residuo ossidabile nella sequenza; la solita scatola chiusa è sufficiente.
• Durata di conservazione: 24 mesi per un flaconcino liofilizzato sigillato conservato freddo; la data sull'etichetta è quella che conta.

Pochi giorni di spedizione a temperatura ambiente non degradano la polvere sigillata. Le regole composte per composto sono in peptidi liofilizzati: conservazione e durata di conservazione.

"Thymosin alpha 1" restituisce pagine enciclopediche, articoli di riviste e cliniche prima di restituire un fornitore di ricerca.

Per un laboratorio che necessita del reagente, l'inserzione che conta risponde a cinque domande sulla pagina stessa.

1. È la molecola giusta? 28 residui, acetilata, 3,108.3 g/mol. Non TB‑500 (889), non Thymalin (una miscela).
2. C'è un lotto COA da un laboratorio indipendente nominato, verificabile sul sito del laboratorio, con purezza HPLC, la massa a 3,108.3 e contenuto netto di peptide?
3. Il COA mostra il flaconcino etichettato del fornitore stesso, e il suo numero di lotto corrisponde al flaconcino che ricevi?
4. Il flaconcino viene spedito da stock domestico, tracciato, in pochi giorni? Il catalogo viene spedito dalla Francia (UE) all'Europa.
5. La pagina descrive solo il reagente (sequenza, documentazione di purezza, conservazione), con "research use only" dichiarato chiaramente? Un fornitore che pubblica contenuti sull'uso è un fornitore facile da chiudere, e quel rischio ricade sull'acquirente il cui pacco è in transito.

Il metodo a sette punti è in come verificare un fornitore di peptidi; la checklist per gli USA in dove acquistare peptidi per ricerca negli USA.