Thymosin alpha-1 (Tα1) peptid: sekvens, hur den levereras, COA, storlekar

Thymosin alpha-1 (Tα1) är en peptid av 28 aminosyror som först isolerades 1977 från kalvthymus av Allan Goldsteins grupp, som hade fraktionerat tymiska extrakt i ett decennium.

Det visade sig senare vara det N-terminala fragmentet av ett större protein, prothymosin alpha, och att bära en acetylgrupp på sin N-terminus, en egenskap som spelar roll på ett certifikat.

Samma sekvens har producerats syntetiskt sedan 1980-talet och är licensierad i flera länder under handelsnamnet Zadaxin.

Det som säljs som thymosin alpha-1 för forskning är den identiska 28-residiga acetylerade peptiden, framställd genom fastfas-syntes, renad genom preparativ HPLC och frystorkad. Endast för forskning.

Inte för humant eller veterinärt bruk.

Tre katalogposter bär ordet "thymosin" eller "thym-", och köpare frågar regelbundet efter en medan de menar en annan. De är tre olika objekt.

Alfa- och beta-tymosinerna är orelaterade sekvenser som råkade isoleras från samma preparat av samma vävnad (tymosinfraktion 5, ett kalvthymusextrakt som först framställdes på 1960-talet), vilket är den enda anledningen till att de delar namn.

Thymalin är den råa fraktion de isolerades från.

En lista som beskriver thymosin alpha-1 med egenskaperna hos TB‑500, eller som ger thymalin en enda molekylmassa, har förväxlat de tre. Den sju-residiga peptiden har sin egen guide: TB‑500 peptid: sekvens, COA, storlekar.

Den N-terminala serinen i thymosin alpha-1 bär en acetylgrupp (CH₃CO-), tillsatt under syntesen som det sista steget på hartset. Den ändrar tre saker som ett certifikat rapporterar.

• Massa. Acetylen lägger till 42,0 dalton. En "thymosin alpha-1" vars massa rekonstruerar till 3 066,3 istället för 3 108,3 var aldrig acetylerad och är des-acetyl-peptiden, en annan molekyl.
• HPLC. Den acetylerade peptiden har ingen fri N-terminal amin, så den eluerar något senare än des-acetyl-formen på omvänd fas. En ofullständig acetylering visas som en liten topp strax före den huvudsakliga; ett välgjort parti visar den under 0,5 %.
• Stabilitet. Utan en fri amin vid N-terminus är peptiden inte ett substrat för aminopeptidaser och genomgår inte de N-terminala sidoreaktionerna (diketopiperazinbildning) som förkortar hållbarheten hos vissa sekvenser. På hyllan är den en av de bättre beteende peptiderna av sin storlek.

Sekvensen innehåller ingen metionin, cystein eller tryptofan, så oxidation är inte oron den är för sermorelin.

Dess nio sura rester gör den starkt hygroskopisk som acetatsalt, vilket är varför en förseglad flaska är viktigare för denna peptid än för de flesta.

HPLC-renhet: en huvudtopp

På omvänd-fas HPLC eluerar peptiden som en enda huvudtopp; renhetssiffran är arean av den toppen mot alla toppar. Över 99 % är specifikationen för katalogpartierna.

Orenheterna att leta efter är des-acetyl-peptiden (eluerar strax före), deletionssekvenser från syntesen (en kedja som saknar en rest) och, för en peptid med så många glutamat- och aspartat-rester, aspartimid-relaterade biprodukter som eluerar nära huvudtoppen.

Masspektrometri: 3 108,3

En peptid av denna storlek och laddning ses av elektrosprayjonisering som multipelt laddade joner, i negativt läge lika lätt som i positivt; rapporten listar de observerade jonerna och den dekonvoluterade massan.

För thymosin alpha-1 är de förväntade värdena i positivt läge ungefär m/z 1 037,1 för [M+3H]³⁺ och 778,1 för [M+4H]⁴⁺, båda rekonstruerande till 3 108,3. En dekonvoluterad 3 066 är des-acetyl-formen.

Nett peptidinnehåll, vatten, endotoxin

Nettinnehåll (genom aminosyraanalys eller UV) talar om hur många av de märkta milligrammen som är peptid; med endast fyra basiska rester att bära acetat-motjoner är 85 till 90 % typiskt för denna sekvens, högre än för en basisk peptid.

Vatten (Karl Fischer) är typiskt 3 till 8 % i en lyofiliserad kaka och stiger snabbt i en öppnad flaska av detta hygroskopiska salt. Endotoxin (LAL, i EU/mg) säger om vattnet och glasvaran vid fyllningen var rena.

Vad mer måste finnas på sidan

• Laboratoriets namn och ett verifierbart testnummer (Janoshik Analytical är referensen på denna marknad).
• Partinummeret, identiskt med det som är tryckt på flaskan.
• Testdatumet och ett fotografi av den testade flaskan med leverantörens etikett. Ett certifikat för en bar tillverkarflaska säger ingenting om den färdiga produkten.

OXpeptides certifikat publiceras per parti i COA-biblioteket och på thymosin alpha-1 produktsidan när varje parti återkommer från laboratoriet. Metoden fält för fält finns i hur man läser ett peptid-COA.

Thymosin alpha-1 finns i lager i en storlek, 10 mg: 10 mg av en 3,1 kDa-peptid är 3,2 mikromol.

Katalogkortet högst upp på denna sida visar det aktuella priset. Volymtrappor gäller från två flaskor (−5 % från 2, −8 % från 3), och prenumerationspriset gäller varje leverans.

Vad priset inkluderar hos OXpeptides: en förseglad, etiketterad flaska från ett testat parti, dess partibatch-COA och en ersättning om paketet kommer bort eller skadas. Levereras från Frankrike (EU), spårad: $19, gratis från $150.

Se thymosin alpha-1 i katalogen →

• Temperatur: −20 °C för långtidsförvaring; ett kylskåp (2 till 8 °C) i några veckor.
• Fukt: det som ska bevakas för denna peptid. Nio sura rester gör acetatsaltet starkt hygroskopiskt; håll flaskan förseglad och i sin låda, och låt en kall flaska nå rumstemperatur innan den lämnar sin påse så att inget vatten kondenserar på glaset.
• Ljus och syre: ingen oxiderbar rest i sekvensen; den vanliga slutna lådan räcker.
• Hållbarhet: 24 månader för en förseglad lyofiliserad flaska som förvaras kallt; datumet på etiketten styr.

Några dagar av omgivningstransport försämrar inte det förseglade pulvret. Reglerna förenade per förening finns i lyofiliserade peptider: förvaring och hållbarhet.

"Thymosin alpha 1" returnerar encyklopediska sidor, journalartiklar och kliniker innan det returnerar en forskningsleverantör.

För ett laboratorium som behöver reagenset är listan som spelar roll den som svarar på fem frågor på sidan själv.

1. Är det rätt molekyl? 28 rester, acetylerad, 3 108,3 g/mol. Inte TB‑500 (889), inte thymalin (en blandning).
2. Finns det ett partibatch-COA från ett namngivet oberoende laboratorium, verifierbart på laboratoriets webbplats, med HPLC-renhet, massan vid 3 108,3 och nett peptidinnehåll?
3. Visar COA leverantörens egen etiketterade flaska, och stämmer dess partinummer med flaskan du får?
4. Skickas flaskan från inhemskt lager, spårad, inom några dagar? Katalogen levereras från Frankrike till Europa.
5. Beskriver sidan endast reagenset (sekvens, renhetsdokumentation, förvaring), med "endast för forskning" angivet tydligt? En leverantör som publicerar användningsinnehåll är en leverantör som är lätt att stänga ner, och den risken landar på köparen vars paket är i transit.

Den sju-punktsmetoden finns i hur man kontrollerar en peptidleverantör; den USA-omfattande checklistan i var man köper forskning peptider i USA.