TB‑500-peptid: tekniskt datablad (sekvens, massa, CAS, form, COA, storlekar)

"TB‑500" är ett handelsnamn.

Det betecknar en syntetisk peptid tillverkad från sekvensen av tymosin β4 (Tβ4), ett 43-residuellt protein som finns i cytosolen hos de flesta celltyper, där det binder monomer aktin.

Namnet specificerar inte vilken del av Tβ4 som syntetiserades, och två olika objekt cirkulerar under det.

Heptapeptidet Ac-LKKTETQ är segmentet av Tβ4 som binder aktin, identifierat i cellfria arbeten från början av 1990-talet.

Det är objektet som beskrivs på TB‑500 produktsidan och i detta blad. Massan på analyscertifikatet är vad som talar om för en köpare vilket av de två objekten som hamnade i en given vial. Endast för forskning.

Inte för humant eller veterinärt bruk.

Listningar stavar namnet på flera sätt: TB‑500, TB500, "TB‑500 acetate", "Tβ4 (17-23)", "thymosin beta-4 fragment".

Stavningen bär ingen information; sekvensen, massan och CAS-numret gör det. En listning som inte ger något av de tre har inte sagt vad den säljer, vad den än kallar det.

Siffrorna nedan är de för katalogposten, med CAS-numret kontrollerat mot PubChem-posten.

Sju rester är kort. På en omvänd-fas-kolonn eluerar heptapeptiden och den 15-residuella BPC‑157 vid olika retentionstider, vilket är hur de två skiljs åt på det enda kromatogrammet av BPC‑157 + TB‑500 vialen.

En syntetisk peptid lämnar preparativ HPLC i en lösning som innehåller trifluoressigsyra från mobilfasen.

Ansedda tillverkare byter ut den motjonen mot acetat före frystorkning, så det som kommer i vialen är acetatsaltet av Ac-LKKTETQ plus några procent bundet vatten. Två konsekvenser följer för den som läser en etikett:

• Renhet och peptidhalt är två siffror. HPLC-renhet (andelen peptid bland peptidliknande material) kan visa 99 % medan peptidhalt (andelen av pulverets massa som är peptid snarare än acetat och vatten) visar 85 till 90 %. Båda är legitima. Ett certifikat rapporterar det första; ett bra rapporterar även det andra. Skillnaden förklaras i HPLC-renhet: vad 99 % betyder.
• Tio milligram är en tunn kaka. I en 3 mL vial ligger 10 mg av en frystorkad heptapeptid som en vit film längst ner, ibland knappt synlig mot glaset. Det är det normala utseendet på fyllningen, inte en kort vial.

Frystorkning avlägsnar vattnet genom sublimering från den frysta lösningen, vilket lämnar peptiden som ett poröst fast ämne som löser sig på sekunder och, förseglad och kall, håller i två år.

Processen och dess gränser beskrivs i frystorkade peptider: lagring och hållbarhet.

För en peptid som säljs under ett handelsnamn gör certifikatet två jobb. Det säger vilket objekt som finns i vialen (identitet) och hur ren den är (renhet). Ett komplett TB‑500-certifikat innehåller:

1. Masspektrometri. En observerad massa som överensstämmer med 889.0 g/mol (M+H⁺ nära 890) för Ac-LKKTETQ. Ett spektrum som dekonvolverar till cirka 4,963 är fullängds Tβ4; ett annat nummer är en annan förening.
2. HPLC-renhet, som en mätt procentandel med kromatogrammet: en dominant topp, och de små toppar som alltid följer med en syntetisk peptid (deletionssekvenser, en de-acetylerad fraktion, oxiderade varianter). Text som säger "≥ 98 %" utan ett spår är ett påstående, inte en mätning.
3. Laboratoriets namn och ett verifierbart testnummer. Janoshik Analytical är referenslaboratoriet på denna marknad; dess rapporter kan slås upp på dess webbplats.
4. Lotnumret tryckt på vialen, testdatumet, och ett fotografi av den testade vialen med leverantörens egen etikett.

OXpeptides publicerar certifikatet för varje TB‑500-lot i COA-biblioteket och på produktsidan. Ett certifikat läses fält för fält i hur man läser ett peptid-COA.

TB‑500 levereras som frystorkat pulver i en förseglad 3 mL borosilikatvial med bromobutylseptum och aluminiumkrympkapsyl, i tre fyllningar:

Katalogkortet överst på denna sida visar aktuellt pris för varje enkelpeptidstorlek.

En 3 mL vial av bakteriostatiskt vatten, laboratoriets lösningsmedel för frystorkade peptider, listas bredvid. Priser, leverantörskontrollistan och "köp"-sidan av frågan finns i TB‑500-köpguiden.

• Förseglad vial: −20 °C, skyddad från ljus och fukt; 2 till 8 °C är acceptabelt i upp till fyra veckor. Hållbarhet 24 månader från fyllningsdatum.
• Kondens: låt en kall vial nå rumstemperatur innan den lämnar sin påse, så att vatten kondenserar på påsen och inte på septum.
• Frakt: några dagar i omgivningstemperatur bryter inte ned det förseglade pulvret, vilket är varför vialen skickas utan kylförpackning.

Heptapeptiden har ingen cystein och ingen metionin, de två rester som är mest benägna att oxideras, och inget aspartat-glycin-par som är benäget för omarrangering, vilket gör den till en av de mer stabila korta peptiderna i katalogen som torrt fast ämne.

Upprepad uppvärmning och nedkylning av en förseglad vial orsakar ingen mätbar skada på det fasta ämnet. Risken är vatten.

Ett septum som punkteras medan glaset fortfarande är kallt drar in kondens, och en våt kaka bryts ned på veckor där en torr håller i två år.

Sök handelsnamnet i en vetenskaplig databas och inget kommer tillbaka. Litteraturen är skriven om tymosin β4, proteinet, och om dess aktinbindande segment.

Två artiklar förankrar kemin. Safer, Elzinga och Nachmias (1991) visade i ett cellfritt system att tymosin β4 är cytosols aktinsekvestrerande peptid.

Goldstein och Kleinman (2005) granskade proteinet och lokaliserade aktinbindande segmentet till rester 17 till 23, LKKTETQ-sekvensen som katalogens TB‑500 reproducerar. Båda listas nedan med sina DOI.

Vad en köpare tar med sig från det: en listning som ger en sekvens, en formel, en massa och ett CAS-nummer beskriver ett objekt som kan kontrolleras mot litteraturen och mot ett masspektrum.

En listning som bara ger handelsnamnet beskriver ingenting.