GHK-Cu vs AHK-Cu: i due tripeptidi di rame confrontati, atomo per atomo

Allineate le due sequenze e la differenza è un singolo carbonio.

• GHK = glicil-L-istidil-L-lisina. La glicina, il primo residuo, ha un idrogeno come catena laterale.
• AHK = L-alanil-L-istidil-L-lisina. L'alanina ha un gruppo metile (CH₃) dove la glicina ha un idrogeno.

Quel gruppo metile aggiunge 14 Da (CH₂) alla massa e introduce un centro chirale al primo residuo.

Tutto il resto è identico: l'istidina al centro, il cui anello imidazolico è ciò che lega il rame, e la lisina alla fine. Ogni tripeptide è quindi complessato con uno ione rame(II) per dare GHK-Cu e AHK-Cu.

GHK è stato isolato dal plasma nel 1973 da Loren Pickart, ed è per questo che ha cinquant'anni di chimica alle spalle.

AHK è un analogo sintetico apparso nella letteratura degli ingredienti cosmetici negli anni 2000. Entrambi sono prodotti oggi per sintesi in fase solida; nessuno dei due è estratto da nulla. Solo per scopi di ricerca.

Non per uso umano o veterinario.

La riga sul contenuto di rame merita un secondo sguardo. In entrambi i complessi un singolo atomo di rame (63,5 g/mol) rappresenta circa un sesto della massa.

Una fiala "100 mg GHK-Cu" contiene quindi circa 16 mg di rame e 84 mg di peptide; un listino che cita la massa del tripeptide senza rame per un complesso di rame ha contato male del 16 %.

Lo ione rame(II) in GHK-Cu è legato da tre atomi del peptide: l'azoto dell'ammina N-terminale (sulla glicina), l'azoto deprotonato del primo legame peptidico e un azoto dell'anello imidazolico dell'istidina.

Un quarto sito sul rame è occupato da acqua o, a concentrazione più alta, da una seconda molecola di GHK.

La geometria è planare quadrata attorno al rame, che è la disposizione che conferisce ai complessi peptidici di rame(II) il loro colore blu-viola.

AHK-Cu lega il rame attraverso gli stessi tre azoti.

Il gruppo metile dell'alanina si trova sul carbonio accanto all'ammina N-terminale, fuori dal piano di coordinazione, quindi cambia l'ambiente immediato del rame senza cambiare quali atomi lo legano.

Due conseguenze sono misurabili:

• Il colore è lo stesso. Entrambe le polveri sono blu-viola, entrambe le soluzioni sono blu. Nulla su un banco le distingue a vista.
• La massa è diversa. Su uno spettro di massa gli ioni del tripeptide libero appaiono a 341,2 (GHK, M+H⁺) e 355,2 (AHK, M+H⁺); il rame si dissocia sotto la solita ionizzazione. Quei 14 Da sono la firma del gruppo metile dell'alanina.

Entrambi i complessi sono stabili come solidi secchi ma sensibili all'ossigeno e alla luce per lunghi periodi in soluzione, motivo per cui la riga di conservazione di entrambe le voci del catalogo aggiunge "ossigeno" al solito "luce e umidità".

Per approfondire: KLOW: i 4 peptidi del flacone da 80 mg.

Poiché i due appaiono identici, sono l'etichetta, la sequenza dichiarata e un'analisi strumentale a dire quale si trova nella fiala.

Tempo di ritenzione

Su una colonna HPLC a fase inversa il gruppo metile extra rende AHK leggermente più idrofobico, quindi AHK-Cu eluisce un po' più tardi di GHK-Cu sotto lo stesso gradiente.

Da solo, quel piccolo spostamento è insufficiente per identificare un composto; diventa utile quando il laboratorio ha eseguito entrambi gli standard. Alcuni laboratori mostrano un cromatogramma, che resta un'opzione.

Conferma di massa

Uno spettro di massa mostra una massa osservata coerente con 340,4 (o un M+H⁺ a 341,2) per GHK o 354,4 (M+H⁺ a 355,2) per AHK. Alcuni laboratori includono questo dato come opzione; non è un requisito.

Saggio del rame

Le analisi più complete aggiungono una determinazione del rame (per ICP o metodo colorimetrico) e la riportano contro il teorico 15-16 %.

Una lettura del rame molto al di sotto significa che la fiala contiene il tripeptide libero, o un complesso fatto con troppo poco rame, e il colore blu sarà più debole del previsto.

Pochi laboratori includono questa riga per impostazione predefinita; chiedetela su un ordine grande.

I rapporti Janoshik di OXpeptides, per il Retatrutide da 10, 20 e 30 mg e il GHK-Cu da 100 mg, sono raccolti nella libreria COA.

Come si legge un certificato di analisi, campo per campo, è in come leggere un COA peptidico; cosa fa e non fa la percentuale HPLC è in purezza HPLC: cosa significa 99 %.

Questa è la differenza pratica più grande tra i due reagenti, ed è un fatto sulla documentazione, non sulle molecole.

GHK-Cu è caratterizzato dal 1973.

La sua struttura cristallina, le sue costanti di legame del rame, il suo comportamento in modelli cellulari in coltura e negli screening di espressione genica (la Connectivity Map dell'Istituto Broad, dove appare per nome) sono pubblicati, recensiti e ri-recensiti.

La review del 2018 di Pickart e Margolina, elencata di seguito, è il punto di ingresso standard.

AHK-Cu ha una manciata di articoli primari, per lo più dal lato degli ingredienti cosmetici e per lo più in modelli cellulari in coltura, di cui Shin et al. (2019) è quello che lo studia per nome accanto a GHK-Cu.

Non esiste una review dedicata.

Un laboratorio che necessita di un reagente con una baseline pubblicata approfondita sceglie GHK-Cu; uno che studia l'analogo stesso sceglie AHK-Cu, e di solito ordina entrambi per eseguirli affiancati.

Quello che un acquirente trae da ciò: qualsiasi listino che descrive AHK-Cu con la letteratura di GHK-Cu sta prendendo in prestito.

I due composti sono separati da un gruppo metile nella struttura e da alcune centinaia di articoli nella documentazione.

Il catalogo offre entrambi come polveri liofilizzate in fiale di borosilicato da 3 mL sigillate con setto di bromobutile e capsula crimp:

GHK-Cu viene in una fiala da 100 mg perché è prodotto su scala industriale e costa meno per milligrammo da produrre; AHK-Cu è una sintesi a volume minore e parte da 50 mg.

I prezzi aggiornati, per fiala e per milligrammo, sono sulle due pagine prodotto, e le domande dal lato acquisto (controlli del fornitore, cosa include il prezzo) sono in la guida all'acquisto di GHK-Cu e la guida all'acquisto di AHK-Cu.

"Peptide di rame" su un marketplace può significare uno dei due composti, una miscela dei due, il tripeptide senza rame o una crema contenente una frazione di un percento di uno di essi. Quattro domande lo chiariscono:

1. La sequenza è scritta? Gly-His-Lys o Ala-His-Lys. "Peptide di rame" da solo è una categoria, non un composto.
2. La massa dichiarata è quella giusta? 340,4 per GHK, 354,4 per AHK (tripeptide libero), con la purezza HPLC indicata come cifra.
3. La polvere è blu-viola e la quantità è indicata in milligrammi? Una polvere bianca non è un complesso di rame; un listino in once fluide è un cosmetico.
4. La pagina descrive solo il reagente? Composition, documentazione di purezza, conservazione, "solo per scopi di ricerca". Una pagina che descrive altro è una pagina che può essere rimossa con un ordine in transito.

Il metodo completo a sette punti è in come controllare un fornitore di peptidi.

Per approfondire: Peptide KPV: cos'è e come viene fornito e Miscela peptidica GLOW.