GHK‑Cu vs AHK‑Cu: i due tripeptidi di rame confrontati, atomo per atomo

Allineate le due sequenze e la differenza è un singolo carbonio.

• GHK = glicil-L-istidil-L-lisina. La glicina, il primo residuo, ha un idrogeno come catena laterale.
• AHK = L-alanil-L-istidil-L-lisina. L'alanina ha un gruppo metile (CH₃) dove la glicina ha un idrogeno.

Quel gruppo metile aggiunge 14 Da (CH₂) alla massa e introduce un centro chirale al primo residuo.

Tutto il resto è identico: l'istidina al centro, il cui anello imidazolico è ciò che lega il rame, e la lisina alla fine. Ogni tripeptide è quindi complessato con uno ione rame(II) per dare GHK‑Cu e AHK‑Cu.

GHK è stato isolato dal plasma nel 1973 da Loren Pickart, ed è per questo che ha cinquant'anni di chimica alle spalle.

AHK è un analogo sintetico apparso nella letteratura degli ingredienti cosmetici negli anni 2000. Entrambi sono prodotti oggi per sintesi in fase solida; nessuno dei due è estratto da nulla. Uso esclusivo per la ricerca.

Non per uso umano o veterinario.

La riga sul contenuto di rame merita un secondo sguardo. In entrambi i complessi un singolo atomo di rame (63.5 g/mol) rappresenta circa un sesto della massa.

Una fiala "100 mg GHK‑Cu" contiene quindi circa 16 mg di rame e 84 mg di peptide; un listino che cita la massa del tripeptide senza rame per un complesso di rame ha contato male del 16 %.

Lo ione rame(II) in GHK‑Cu è legato da tre atomi del peptide: l'azoto dell'ammina N-terminale (sulla glicina), l'azoto deprotonato del primo legame peptidico e un azoto dell'anello imidazolico dell'istidina.

Un quarto sito sul rame è occupato da acqua o, a concentrazione più alta, da una seconda molecola di GHK.

La geometria è planare quadrata attorno al rame, che è la disposizione che conferisce ai complessi peptidici di rame(II) il loro colore blu-viola.

AHK‑Cu lega il rame attraverso gli stessi tre azoti.

Il gruppo metile dell'alanina si trova sul carbonio accanto all'ammina N-terminale, fuori dal piano di coordinazione, quindi cambia l'ambiente immediato del rame senza cambiare quali atomi lo legano.

Due conseguenze sono misurabili:

• Il colore è lo stesso. Entrambe le polveri sono blu-viola, entrambe le soluzioni sono blu. Nulla su un banco le distingue a vista.
• La massa è diversa. Su uno spettro di massa gli ioni del tripeptide libero appaiono a 341.2 (GHK, M+H⁺) e 355.2 (AHK, M+H⁺); il rame si dissocia sotto la solita ionizzazione, quindi il certificato riporta la massa del peptide e il divario di 14 Da è il controllo di identità.

Entrambi i complessi sono stabili come solidi secchi ma sensibili all'ossigeno e alla luce per lunghi periodi in soluzione, motivo per cui la riga di conservazione di entrambe le voci del catalogo aggiunge "ossigeno" al solito "luce e umidità".

Poiché i due appaiono identici, il certificato di analisi è l'unico documento che dice a un acquirente quale si trova nella fiala. Tre righe fanno il lavoro.

Tempo di ritenzione

Su una colonna HPLC a fase inversa il gruppo metile extra rende AHK leggermente più idrofobico, quindi AHK‑Cu eluisce un po' più tardi di GHK‑Cu sotto lo stesso gradiente.

Da solo, quel piccolo spostamento è insufficiente per identificare un composto; diventa utile quando il laboratorio ha eseguito entrambi gli standard, ed è il motivo per cui un fornitore che elenca entrambi deve mostrare un cromatogramma separato per ciascuno.

Conferma di massa

La riga decisiva. Una massa osservata coerente con 340.4 (o un M+H⁺ a 341.2) significa GHK; 354.4 (M+H⁺ a 355.2) significa AHK.

Un certificato che mostra la massa GHK su una fiala di AHK‑Cu ha testato il composto sbagliato, o la fiala contiene il composto sbagliato.

Saggio del rame

I migliori certificati aggiungono una determinazione del rame (per ICP o metodo colorimetrico) e la riportano contro il teorico 15-16 %.

Una lettura del rame molto al di sotto significa che la fiala contiene il tripeptide libero, o un complesso fatto con troppo poco rame, e il colore blu sarà più debole del previsto.

Pochi laboratori includono questa riga per impostazione predefinita; chiedetela su un ordine grande.

I certificati di OXpeptides sono pubblicati per lotto nella libreria COA.

I campi rimanenti (laboratorio, numero di test verificabile, lotto, data, foto della fiala etichettata) sono gli stessi per ogni peptide e si leggono in come leggere un COA peptidico; cosa fa e non fa la percentuale HPLC è in purezza HPLC: cosa significa 99 %.

Questa è la differenza pratica più grande tra i due reagenti, ed è un fatto sulla documentazione, non sulle molecole.

GHK‑Cu è caratterizzato dal 1973.

La sua struttura cristallina, le sue costanti di legame del rame, il suo comportamento in modelli cellulari in coltura e negli screening di espressione genica (la Connectivity Map dell'Istituto Broad, dove appare per nome) sono pubblicati, recensiti e ri-recensiti.

La review del 2018 di Pickart e Margolina, elencata di seguito, è il punto di ingresso standard.

AHK‑Cu ha una manciata di articoli primari, per lo più dal lato degli ingredienti cosmetici e per lo più in modelli cellulari in coltura, di cui Shin et al. (2019) è quello che lo studia per nome accanto a GHK‑Cu.

Non esiste una review dedicata.

Un laboratorio che necessita di un reagente con una baseline pubblicata approfondita sceglie GHK‑Cu; uno che studia l'analogo stesso sceglie AHK‑Cu, e di solito ordina entrambi per eseguirli affiancati.

Quello che un acquirente trae da ciò: qualsiasi listino che descrive AHK‑Cu con la letteratura di GHK‑Cu sta prendendo in prestito.

I due composti sono separati da un gruppo metile nella struttura e da alcune centinaia di articoli nella documentazione.

Il catalogo offre entrambi come polveri liofilizzate in fiale di borosilicato da 3 mL sigillate con setto di bromobutile e capsula crimp:

GHK‑Cu viene in fiale più grandi perché è prodotto su scala industriale e costa meno per milligrammo da produrre; AHK‑Cu è una sintesi a volume minore e parte da 50 mg.

I prezzi aggiornati, per fiala e per milligrammo, sono sulle due pagine prodotto, e le domande dal lato acquisto (controlli del fornitore, cosa include il prezzo) sono in la guida all'acquisto di GHK‑Cu e la guida all'acquisto di AHK‑Cu.

"Peptide di rame" su un marketplace può significare uno dei due composti, una miscela dei due, il tripeptide senza rame o una crema contenente una frazione di un percento di uno di essi. Quattro domande lo chiariscono:

1. La sequenza è scritta? Gly-His-Lys o Ala-His-Lys. "Peptide di rame" da solo è una categoria, non un composto.
2. La massa sul certificato è quella giusta? 340.4 per GHK, 354.4 per AHK, su un rapporto di un laboratorio nominato che può essere verificato.
3. La polvere è blu-viola e la quantità è indicata in milligrammi? Una polvere bianca non è un complesso di rame; un listino in once fluide è un cosmetico.
4. La pagina descrive solo il reagente? Composizione, documentazione di purezza, conservazione, "uso esclusivo per la ricerca". Una pagina che descrive altro è una pagina che può essere rimossa con un ordine in transito.

Il metodo completo a sette punti è in come controllare un fornitore di peptidi.