Thymosin alpha-1 (Tα1) πεπτίδιο: αλληλουχία, τρόπος προμήθειας, COA, μεγέθη

Thymosin alpha-1 (Tα1) είναι ένα πεπτίδιο 28 αμινοξέων που απομονώθηκε για πρώτη φορά το 1977 από θύμο μόσχου από την ομάδα του Allan Goldstein, η οποία κλασμάτωνε θυμικά εκχυλίσματα για μια δεκαετία. Αργότερα αποδείχθηκε ότι είναι το Ν-τερματικό τμήμα μιας μεγαλύτερης πρωτεΐνης, της prothymosin alpha, και ότι φέρει ακετυλομάδα στο Ν-τερματικό του, χαρακτηριστικό που έχει σημασία σε ένα πιστοποιητικό.

Η ίδια αλληλουχία παράγεται συνθετικά από τη δεκαετία του 1980 και έχει άδεια σε αρκετές χώρες με την εμπορική ονομασία Zadaxin. Αυτό που πωλείται ως thymosin alpha-1 για έρευνα είναι το ταυτόσημο ακετυλιωμένο πεπτίδιο 28 υπολειμμάτων, παρασκευασμένο με σύνθεση στερεάς φάσης, καθαρισμένο με παρασκευαστική HPLC και λυοφιλοποιημένο. Χρήση μόνο για έρευνα. Δεν προορίζεται για ανθρώπινη ή κτηνιατρική χρήση.

Τρεις καταχωρίσεις καταλόγου φέρουν τη λέξη «thymosin» ή «thym-», και οι αγοραστές ζητούν συχνά το ένα ενώ εννοούν το άλλο. Είναι τρία διαφορετικά αντικείμενα.

Τα α και β θυμοσίνες είναι άσχετες αλληλουχίες που τυχαίνει να απομονώθηκαν από την ίδια παρασκευή του ίδιου ιστού (κλάσμα θυμοσίνης 5, ένα εκχύλισμα θύμου μόσχου που παρασκευάστηκε για πρώτη φορά τη δεκαετία του 1960), που είναι ο μόνος λόγος που μοιράζονται όνομα. Το Thymalin είναι το ακατέργαστο κλάσμα από το οποίο απομονώθηκαν. Μια καταχώριση που περιγράφει το thymosin alpha-1 με τις ιδιότητες του TB‑500, ή που δίνει στο thymalin μία μοναδική μοριακή μάζα, έχει συγχέει τα τρία. Το επτα-υπολείμματος πεπτίδιο έχει τον δικό του οδηγό: TB‑500 πεπτίδιο: αλληλουχία, COA, μεγέθη.

Η Ν-τερματική σερίνη του thymosin alpha-1 φέρει ακετυλομάδα (CH₃CO-), προστιθέμενη κατά τη σύνθεση ως τελευταίο βήμα στη ρητίνη. Αλλάζει τρία πράγματα που αναφέρει ένα πιστοποιητικό.

• Μάζα. Η ακετυλομάδα προσθέτει 42.0 dalton. Ένα «thymosin alpha-1» του οποίου η μάζα ανακατασκευάζεται σε 3,066.3 αντί για 3,108.3 δεν ακετυλιώθηκε ποτέ και είναι το des-acetyl πεπτίδιο, διαφορετικό μόριο.
• HPLC. Το ακετυλιωμένο πεπτίδιο δεν έχει ελεύθερη Ν-τερματική αμίνη, οπότε εκλούεται ελαφρώς αργότερα από τη des-acetyl μορφή σε αντίστροφη φάση. Μια ατελής ακετυλίωση εμφανίζεται ως μικρή κορυφή ακριβώς πριν την κύρια· μια καλά παρασκευασμένη παρτίδα την δείχνει κάτω από 0.5 %.
• Σταθερότητα. Χωρίς ελεύθερη αμίνη στο Ν-τερματικό, το πεπτίδιο δεν είναι υπόστρωμα για αμινοπεπτιδάσες και δεν υφίσταται τις Ν-τερματικές παράπλευρες αντιδράσεις (σχηματισμός δικετοπιπεραζίνης) που συντομεύουν τη διάρκεια ζωής ορισμένων αλληλουχιών. Στο ράφι είναι ένα από τα καλύτερα συμπεριφερόμενα πεπτίδια του μεγέθους του.

Η αλληλουχία δεν περιέχει μεθειονίνη, κυστεΐνη ή τρυπτοφάνη, οπότε η οξείδωση δεν είναι η ανησυχία που είναι για το sermorelin. Τα εννέα όξινα υπολείμματά του το καθιστούν έντονα υγροσκοπικό ως άλας οξικού, γι’ αυτό ένα σφραγισμένο φιαλίδιο έχει μεγαλύτερη σημασία για αυτό το πεπτίδιο από ό,τι για τα περισσότερα.

Καθαρότητα HPLC: μία κύρια κορυφή

Σε HPLC αντίστροφης φάσης το πεπτίδιο εκλούεται ως μία κύρια κορυφή· το ποσοστό καθαρότητας είναι η περιοχή αυτής της κορυφής έναντι όλων των κορυφών. Πάνω από 99 % είναι η προδιαγραφή για τις παρτίδες του καταλόγου. Οι ακαθαρσίες που πρέπει να αναζητηθούν είναι το des-acetyl πεπτίδιο (εκλούεται ακριβώς πριν), αλληλουχίες διαγραφής από τη σύνθεση (μια αλυσίδα που λείπει ένα υπόλειμμα) και, για ένα πεπτίδιο με τόσο πολλά υπολείμματα γλουταμινικού και ασπαρτικού, υποπροϊόντα σχετιζόμενα με ασπαρτιμίδιο που εκλούονται κοντά στην κύρια κορυφή.

Φασματομετρία μάζας: 3,108.3

Ένα πεπτίδιο αυτού του μεγέθους και φορτίου παρατηρείται με ιονισμό ηλεκτροψεκασμού ως ιόντα πολλαπλώς φορτισμένα, σε αρνητική λειτουργία εξίσου εύκολα με τη θετική· η αναφορά παραθέτει τα παρατηρούμενα ιόντα και την αποσυμπλεγμένη μάζα. Για το thymosin alpha-1 οι αναμενόμενες τιμές σε θετική λειτουργία είναι περίπου m/z 1,037.1 για [M+3H]³⁺ και 778.1 για [M+4H]⁴⁺, και τα δύο ανακατασκευάζονται σε 3,108.3. Μια αποσυμπλεγμένη 3,066 είναι η des-acetyl μορφή.

Καθαρή περιεκτικότητα πεπτιδίου, νερό, ενδοτοξίνη

Η καθαρή περιεκτικότητα (με ανάλυση αμινοξέων ή UV) δείχνει πόσα από τα επισημασμένα χιλιοστόγραμμα είναι πεπτίδιο· με μόνο τέσσερα βασικά υπολείμματα για να φέρουν αντιιόντα οξικού, 85 έως 90 % είναι τυπικό για αυτή την αλληλουχία, υψηλότερο από ό,τι για ένα βασικό πεπτίδιο. Το νερό (Karl Fischer) είναι τυπικά 3 έως 8 % σε ένα λυοφιλοποιημένο κέικ και ανεβαίνει γρήγορα σε ανοιχτό φιαλίδιο αυτού του υγροσκοπικού άλατος. Η ενδοτοξίνη (LAL, σε EU/mg) δείχνει αν το νερό και τα γυαλικά της πλήρωσης ήταν καθαρά.

Τι άλλο πρέπει να υπάρχει στη σελίδα

• Το όνομα του εργαστηρίου και ένας επαληθεύσιμος αριθμός δοκιμής (Janoshik Analytical είναι η αναφορά σε αυτή την αγορά).
• Ο αριθμός παρτίδας, ταυτόσημος με αυτόν που εκτυπώνεται στο φιαλίδιο.
• Η ημερομηνία δοκιμής και μια φωτογραφία του δοκιμασμένου φιαλιδίου που φέρει την ετικέτα του προμηθευτή. Ένα πιστοποιητικό για γυμνό φιαλίδιο του κατασκευαστή δεν λέει τίποτα για το τελικό προϊόν.

Τα πιστοποιητικά της OXpeptides δημοσιεύονται ανά παρτίδα στη βιβλιοθήκη COA και στη σελίδα προϊόντος thymosin alpha-1 καθώς κάθε παρτίδα επιστρέφει από το εργαστήριο. Η μέθοδος πεδίο προς πεδίο βρίσκεται στο πώς να διαβάσετε ένα COA πεπτιδίου.

Το Thymosin alpha-1 αποθηκεύεται σε ένα μέγεθος, 10 mg: 10 mg ενός πεπτιδίου 3.1 kDa είναι 3.2 μικρομόρια. Η κάρτα καταλόγου στην κορυφή αυτής της σελίδας δείχνει την τρέχουσα τιμή. Ισχύουν βαθμίδες όγκου από δύο φιαλίδια (−5 % από 2, −8 % από 3), και η τιμή συνδρομής ισχύει για κάθε παράδοση.

Τι περιλαμβάνει η τιμή στην OXpeptides: ένα σφραγισμένο, επισημασμένο φιαλίδιο από δοκιμασμένη παρτίδα, το COA παρτίδας του και αντικατάσταση αν το δέμα φτάσει χαμένο ή κατεστραμμένο. Αποστέλλεται από Γαλλία (ΕΕ), παρακολουθούμενο: $19, δωρεάν από $150.

Δείτε το thymosin alpha-1 στον κατάλογο →

• Θερμοκρασία: −20 °C για μακροπρόθεσμη αποθήκευση· ψυγείο (2 έως 8 °C) για λίγες εβδομάδες.
• Υγρασία: το σημείο που πρέπει να προσέξετε για αυτό το πεπτίδιο. Εννέα όξινα υπολείμματα καθιστούν το άλας οξικού έντονα υγροσκοπικό· κρατήστε το φιαλίδιο σφραγισμένο και στο κουτί του, και αφήστε ένα κρύο φιαλίδιο να φτάσει σε θερμοκρασία δωματίου πριν βγει από την τσάντα του ώστε να μην συμπυκνωθεί νερό στο γυαλί.
• Φως και οξυγόνο: κανένα οξειδώσιμο υπόλειμμα στην αλληλουχία· το συνηθισμένο κλειστό κουτί αρκεί.
• Διάρκεια ζωής: 24 μήνες για σφραγισμένο λυοφιλοποιημένο φιαλίδιο αποθηκευμένο ψυχρό· η ημερομηνία στην ετικέτα ισχύει.

Λίγες ημέρες περιβάλλοντος αποστολής δεν υποβαθμίζουν τη σφραγισμένη σκόνη. Οι κανόνες ανά ένωση βρίσκονται στο λυοφιλοποιημένα πεπτίδια: αποθήκευση και διάρκεια ζωής.

Η αναζήτηση «Thymosin alpha 1» επιστρέφει εγκυκλοπαιδικές σελίδες, άρθρα περιοδικών και κλινικές πριν επιστρέψει έναν προμηθευτή έρευνας. Για ένα εργαστήριο που χρειάζεται το αντιδραστήριο, η καταχώριση που έχει σημασία απαντά σε πέντε ερωτήσεις στην ίδια τη σελίδα.

1. Είναι το σωστό μόριο; 28 υπολείμματα, ακετυλιωμένο, 3,108.3 g/mol. Όχι TB‑500 (889), όχι thymalin (ένα μείγμα).
2. Υπάρχει COA παρτίδας από ονομασμένο ανεξάρτητο εργαστήριο, επαληθεύσιμο στον ιστότοπο του εργαστηρίου, με καθαρότητα HPLC, τη μάζα στα 3,108.3 και καθαρή περιεκτικότητα πεπτιδίου;
3. Δείχνει το COA το δικό του επισημασμένο φιαλίδιο του προμηθευτή, και ο αριθμός παρτίδας του ταιριάζει με το φιαλίδιο που λαμβάνετε;
4. Αποστέλλεται το φιαλίδιο από εγχώριο απόθεμα, παρακολουθούμενο, σε λίγες ημέρες; Ο κατάλογος αποστέλλεται από Γαλλία στην Ευρώπη.
5. Περιγράφει η σελίδα μόνο το αντιδραστήριο (αλληλουχία, τεκμηρίωση καθαρότητας, αποθήκευση), με το «Χρήση μόνο για έρευνα» δηλωμένο σαφώς; Ένας προμηθευτής που δημοσιεύει περιεχόμενο χρήσης είναι προμηθευτής που είναι εύκολο να κλείσει, και αυτός ο κίνδυνος πέφτει στον αγοραστή του οποίου το δέμα βρίσκεται σε μεταφορά.

Η επτασημεία μέθοδος βρίσκεται στο πώς να ελέγξετε έναν προμηθευτή πεπτιδίων; ο έλεγχος σε όλη την ΕΕ βρίσκεται στο πού να αγοράσετε πεπτίδια έρευνας στις ΗΠΑ.