TB‑500 peptide: τεχνικό δελτίο δεδομένων (αλληλουχία, μάζα, CAS, μορφή, COA, μεγέθη)

Το «TB‑500» είναι εμπορική ονομασία. Ορίζει ένα συνθετικό πεπτίδιο κατασκευασμένο από την αλληλουχία της θυμοσίνης β4 (Tβ4), μιας πρωτεΐνης 43 υπολειμμάτων παρούσας στο κυτταρόπλασμα των περισσότερων τύπων κυττάρων, όπου δεσμεύει μονομερική ακτίνη. Η ονομασία δεν προσδιορίζει ποιο μέρος της Tβ4 συντέθηκε και δύο διαφορετικά αντικείμενα κυκλοφορούν με αυτήν.

Το επταπεπτίδιο Ac-LKKTETQ είναι το τμήμα της Tβ4 που δεσμεύει ακτίνη, ταυτοποιημένο σε κυτταροελεύθερες εργασίες των αρχών της δεκαετίας του 1990. Είναι το αντικείμενο που περιγράφεται στη σελίδα προϊόντος TB‑500 και σε αυτό το δελτίο. Η μάζα στο πιστοποιητικό ανάλυσης είναι αυτή που δείχνει σε έναν αγοραστή ποιο από τα δύο αντικείμενα περιείχε ένα δεδομένο φιαλίδιο. Χρήση μόνο για έρευνα. Δεν προορίζεται για ανθρώπινη ή κτηνιατρική χρήση.

Οι καταχωρίσεις γράφουν το όνομα με διάφορους τρόπους: TB‑500, TB500, «TB‑500 acetate», «Tβ4 (17-23)», «thymosin beta-4 fragment». Η ορθογραφία δεν παρέχει πληροφορίες· η αλληλουχία, η μάζα και ο αριθμός CAS το κάνουν. Μια καταχώριση που δεν δίνει κανένα από τα τρία δεν έχει δηλώσει τι πωλεί, όποιο όνομα και αν χρησιμοποιεί.

Οι αριθμοί παρακάτω είναι εκείνοι της καταχώρισης του καταλόγου, με τον αριθμό CAS ελεγμένο έναντι της εγγραφής PubChem.

Επτά υπολείμματα είναι λίγα. Σε στήλη αντίστροφης φάσης το επταπεπτίδιο και το 15-υπολείμματος BPC‑157 εκλούονται σε διαφορετικούς χρόνους κατακράτησης, που είναι ο τρόπος διαχωρισμού τους στο ενιαίο χρωματογράφημα του φιαλιδίου BPC‑157 + TB‑500.

Ένα συνθετικό πεπτίδιο εξέρχεται από την παρασκευαστική HPLC σε διάλυμα που περιέχει τριφθοροξικό οξύ από την κινητή φάση. Αξιόπιστοι κατασκευαστές αντικαθιστούν αυτό το αντιιόν με οξικό πριν από την ξήρανση με κατάψυξη, οπότε αυτό που φτάνει στο φιαλίδιο είναι το οξικό άλας του Ac-LKKTETQ συν μερικά τοις εκατό δεσμευμένου νερού. Δύο συνέπειες ακολουθούν για όποιον διαβάζει μια ετικέτα:

• Η καθαρότητα και η περιεκτικότητα σε πεπτίδιο είναι δύο αριθμοί. Η καθαρότητα HPLC (το ποσοστό πεπτιδίου μεταξύ υλικού παρόμοιου με πεπτίδιο) μπορεί να δείχνει 99 % ενώ η περιεκτικότητα σε πεπτίδιο (το ποσοστό της μάζας της σκόνης που είναι πεπτίδιο και όχι οξικό και νερό) δείχνει 85 έως 90 %. Και τα δύο είναι νόμιμα. Ένα πιστοποιητικό αναφέρει το πρώτο· ένα καλό αναφέρει και το δεύτερο. Η διαφορά εξηγείται στο HPLC καθαρότητα: τι σημαίνει 99 %.
• Δέκα χιλιοστόγραμμα είναι ένα λεπτό στρώμα. Σε φιαλίδιο 3 mL, 10 mg ενός λυοφιλοποιημένου επταπεπτιδίου βρίσκεται ως λευκή μεμβράνη στον πυθμένα, μερικές φορές μόλις ορατή πάνω στο γυαλί. Αυτή είναι η κανονική εμφάνιση του περιεχομένου, όχι φιαλίδιο με λιγότερο.

Η λυοφιλίωση αφαιρεί το νερό με εξάχνωση από το κατεψυγμένο διάλυμα, αφήνοντας το πεπτίδιο ως πορώδες στερεό που διαλύεται σε δευτερόλεπτα και, σφραγισμένο και ψυχρό, διατηρείται για δύο χρόνια. Η διαδικασία και τα όριά της περιγράφονται στο λυοφιλοποιημένα πεπτίδια: αποθήκευση και διάρκεια ζωής.

Για ένα πεπτίδιο που πωλείται με εμπορική ονομασία, το πιστοποιητικό εκτελεί δύο εργασίες. Δηλώνει ποιο αντικείμενο βρίσκεται στο φιαλίδιο (ταυτότητα) και πόσο καθαρό είναι (καθαρότητα). Ένα πλήρες πιστοποιητικό TB‑500 περιλαμβάνει:

1. Φασματομετρία μάζας. Μια παρατηρούμενη μάζα συνεπής με 889.0 g/mol (M+H⁺ κοντά στο 890) για Ac-LKKTETQ. Ένα φάσμα που αποσυντίθεται σε περίπου 4,963 είναι πλήρους μήκους Tβ4· ένας διαφορετικός αριθμός είναι διαφορετική ένωση.
2. Καθαρότητα HPLC, ως μετρούμενο ποσοστό με το χρωματογράφημα: μία κυρίαρχη κορυφή και οι μικρές κορυφές που συνοδεύουν πάντα ένα συνθετικό πεπτίδιο (ακολουθίες διαγραφής, ένα κλάσμα αποακετυλιωμένο, οξειδωμένες παραλλαγές). Κείμενο που λέει «≥ 98 %» χωρίς ίχνος είναι ισχυρισμός, όχι μέτρηση.
3. Το όνομα του εργαστηρίου και έναν επαληθεύσιμο αριθμό δοκιμής. Το Janoshik Analytical είναι το εργαστήριο αναφοράς αυτής της αγοράς· οι αναφορές του μπορούν να αναζητηθούν στον ιστότοπό του.
4. Ο αριθμός παρτίδας τυπωμένος στο φιαλίδιο, η ημερομηνία δοκιμής και μια φωτογραφία του δοκιμασμένου φιαλιδίου που φέρει την ετικέτα του προμηθευτή.

Η OXpeptides δημοσιεύει το πιστοποιητικό κάθε παρτίδας TB‑500 στη Βιβλιοθήκη COA και στη σελίδα του προϊόντος. Ένα πιστοποιητικό διαβάζεται πεδίο προς πεδίο στο πώς να διαβάσετε ένα COA πεπτιδίου.

Το TB‑500 παρέχεται ως λυοφιλοποιημένη σκόνη σε σφραγισμένο φιαλίδιο 3 mL βοριοπυριτικού γυαλιού με διάφραγμα βρωμοβουτυλίου και καπάκι αλουμινίου, σε τρεις πλήρωσεις:

Η κάρτα καταλόγου στην κορυφή αυτής της σελίδας δείχνει την τρέχουσα τιμή κάθε μεγέθους μονού πεπτιδίου. Ένα φιαλίδιο 3 mL βακτηριοστατικού νερού, του εργαστηριακού διαλύτη για λυοφιλοποιημένα πεπτίδια, παρατίθεται δίπλα. Οι τιμές, η λίστα ελέγχου προμηθευτή και η πλευρά «αγορά» του θέματος βρίσκονται στο οδηγό αγοράς TB‑500.

• Σφραγισμένο φιαλίδιο: −20 °C, προστατευμένο από φως και υγρασία· 2 έως 8 °C είναι αποδεκτό για έως τέσσερις εβδομάδες. Διάρκεια ζωής 24 μήνες από την ημερομηνία πλήρωσης.
• Συμπύκνωση: αφήστε ένα ψυχρό φιαλίδιο να φτάσει σε θερμοκρασία δωματίου πριν βγει από τη σακούλα του, ώστε το νερό να συμπυκνωθεί στη σακούλα και όχι στο διάφραγμα.
• Αποστολή: λίγες ημέρες σε περιβάλλον θερμοκρασία δεν υποβαθμίζουν την σφραγισμένη σκόνη, γι’ αυτό το φιαλίδιο αποστέλλεται χωρίς ψυκτικό πακέτο.

Το επταπεπτίδιο δεν έχει κυστεΐνη ούτε μεθειονίνη, τα δύο υπολείμματα πιο επιρρεπή σε οξείδωση, ούτε ζεύγος ασπαρτικού-γλυκίνης επιρρεπές σε αναδιάταξη, γεγονός που το καθιστά ένα από τα πιο σταθερά βραχέα πεπτίδια του καταλόγου ως ξηρό στερεό. Επαναλαμβανόμενη θέρμανση και ψύξη ενός σφραγισμένου φιαλιδίου δεν προκαλεί μετρήσιμη βλάβη σε αυτό το στερεό. Ο κίνδυνος είναι το νερό. Ένα διάφραγμα που τρυπιέται ενώ το γυαλί είναι ακόμα ψυχρό τραβά συμπύκνωση και μια υγρή μάζα υποβαθμίζεται σε εβδομάδες όπου μια ξηρή διατηρείται για δύο χρόνια.

Αναζήτηση της εμπορικής ονομασίας σε επιστημονική βάση δεδομένων δεν αποδίδει αποτελέσματα. Η βιβλιογραφία γράφεται για τη θυμοσίνη β4, την πρωτεΐνη, και για το τμήμα της που δεσμεύει ακτίνη. Δύο άρθρα αγκυρώνουν τη χημεία. Οι Safer, Elzinga και Nachmias (1991) έδειξαν σε κυτταροελεύθερο σύστημα ότι η θυμοσίνη β4 είναι το πεπτίδιο δέσμευσης ακτίνης του κυτταροπλάσματος. Οι Goldstein και Kleinman (2005) ανασκόπησαν την πρωτεΐνη και εντόπισαν το τμήμα δέσμευσης ακτίνης στα υπολείμματα 17 έως 23, την αλληλουχία LKKTETQ που αναπαράγει το TB‑500 του καταλόγου. Και τα δύο παρατίθενται παρακάτω με το DOI τους.

Αυτό που παίρνει ένας αγοραστής από αυτό: μια καταχώριση που δίνει αλληλουχία, τύπο, μάζα και αριθμό CAS περιγράφει ένα αντικείμενο που μπορεί να ελεγχθεί έναντι της βιβλιογραφίας και ενός φάσματος μάζας. Μια καταχώριση που δίνει μόνο την εμπορική ονομασία δεν περιγράφει τίποτα.