Timozin alfa-1 (Tα1) peptid: zaporedje, kako je dobavljen, COA, velikosti

Thymosin alpha-1 (Tα1) je peptid 28 aminokislin, ki so ga prvič izolirali leta 1977 iz telečjega timusa v skupini Allana Goldsteina, ki je že desetletje frakcionirala timusne ekstrakte.

Kasneje se je izkazalo, da je N-terminalni fragment večjega proteina, protimozina alfa, in da nosi acetilno skupino na N-terminusu, kar je pomembna lastnost na certifikatu.

Isto zaporedje se sintetično proizvaja od 1980-ih in je licencirano v več državah pod trgovsko znamko Zadaxin.

Kar se prodaja kot timozin alfa-1 za raziskave, je identičen 28-ostankov acetiliran peptid, izdelan s sintezo na trdni fazi, prečiščen s preparativno HPLC in liofiliziran. Samo za raziskovalno uporabo.

Ni za človeško ali veterinarsko uporabo.

Tri vnosi v katalogu vsebujejo besedo "thymosin" ali "thym-", kupci pa redno zahtevajo enega, medtem ko mislijo drugega. To so trije različni objekti.

Alfa in beta timozini so nepovezana zaporedja, ki so bila izolirana iz iste priprave istega tkiva (timozinska frakcija 5, ekstrakt telečjega timusa, prvič pripravljen v 1960. letih), kar je edini razlog, da si delijo ime.

Thymalin je surova frakcija, iz katere so bili izolirani.

Seznam, ki opisuje thymosin alpha-1 z lastnostmi TB‑500 ali ki daje thymalinu eno samo molekulsko maso, je zmedel tri. Sedemostankovni peptid ima svoj vodnik: TB‑500 peptid: zaporedje, COA, velikosti.

N-terminalni serin timozina alfa-1 nosi acetilno skupino (CH₃CO-), dodano med sintezo kot zadnji korak na smoli. Spremeni tri stvari, ki jih poroča certifikat.

• Masa. Acetil doda 42,0 daltonov. "Timozin alfa-1", katerega masa se rekonstruira na 3.066,3 namesto 3.108,3, ni bil nikoli acetiliran in je des-acetilni peptid, drugačna molekula.
• HPLC. Acetilirani peptid nima proste N-terminalne amine, zato na reverzni fazi eluira nekoliko kasneje kot des-acetilna oblika. Nepopolna acetilacija se pokaže kot majhen vrh tik pred glavnim; dobro izdelana serija ga kaže pod 0,5 %.
• Stabilnost. Brez proste amine na N-terminusu peptid ni substrat za aminopeptidaze in ne prehaja N-terminalnih stranskih reakcij (tvorba diketopiperazina), ki skrajšajo rok uporabnosti nekaterih zaporedij. Na polici je eden od bolje obnašajočih se peptidov svoje velikosti.

Zaporedje ne vsebuje metionina, cisteina ali triptofana, zato oksidacija ni skrb, kot je pri sermorelinu.

Devet kislih ostankov ga naredi močno higroskopnega kot acetatno sol, zato je za ta peptid zaprta viala pomembnejša kot za večino.

Čistost HPLC: en glavni vrh

Na reverzni fazi HPLC peptid eluira kot en glavni vrh; številka čistosti je površina tega vrha proti vsem vrhovom. Nad 99 % je specifikacija za katalogske serije.

Nečistoče, ki jih je treba iskati, so des-acetilni peptid (eluira tik pred), delecijska zaporedja iz sinteze (veriga, ki manjka en ostanek) in pri peptidu s toliko glutamatnimi in aspartatnimi ostanki aspartimidni stranski produkti, ki eluirajo blizu glavnega vrha.

Masna spektrometrija: 3.108,3

Peptid te velikosti in naboja se pri elektrosprejni ionizaciji vidi kot večkrat nabiti ioni, v negativnem načinu enako enostavno kot v pozitivnem; poročilo navaja opazovane ione in dekonvoluirano maso.

Za timozin alfa-1 so pričakovane vrednosti v pozitivnem načinu približno m/z 1.037,1 za [M+3H]³⁺ in 778,1 za [M+4H]⁴⁺, obe rekonstruirata na 3.108,3. Dekonvoluirana 3.066 je des-acetilna oblika.

Neto vsebnost peptida, voda, endotoksin

Neto vsebnost (z analizo aminokislin ali UV) pove, koliko od označenih miligramov je peptid; s samo štirimi bazičnimi ostanki za prenašanje acetatnih protiionov je 85 do 90 % tipično za to zaporedje, višje kot pri bazičnem peptidu.

Voda (Karl Fischer) je običajno 3 do 8 % v liofilizirani tortici in hitro naraste v odprti viali te higroskopne soli. Endotoksin (LAL, v EU/mg) pove, ali sta bila voda in steklovina polnjenja čista.

Kaj še mora biti na strani

• Ime laboratorija in preverljiva številka testa (Janoshik Analytical je referenca na tem trgu).
• Številka serije, enaka tisti, natisnjeni na viali.
• Datum testa in fotografija testirane viale z nalepko dobavitelja. Certifikat za golo vialo proizvajalca ne pove ničesar o končnem izdelku.

Certifikati OXpeptides so objavljeni po serijah v knjižnici COA in na strani izdelka timozin alfa-1, ko se vsaka serija vrne iz laboratorija. Metoda po poljih je v kako brati COA peptida.

Timozin alfa-1 je na zalogi v eni velikosti, 10 mg: 10 mg peptida 3,1 kDa je 3,2 mikromola.

Kataloška kartica na vrhu te strani prikazuje trenutno ceno. Veljavni so obsežni popusti od dveh vial (−5 % od 2, −8 % od 3), naročniška cena pa velja za vsako dostavo.

Kaj cena vključuje pri OXpeptides: zaprto, označeno vialo iz testirane serije, njen serijski COA in zamenjavo, če je pošiljka izgubljena ali poškodovana. Pošiljeno iz Francije (EU), s sledenjem: $19, brezplačno od $150.

Poglejte timozin alfa-1 v katalogu →

• Temperatura: −20 °C za dolgoročno shranjevanje; hladilnik (2 do 8 °C) za nekaj tednov.
• Vlaga: točka, ki jo je treba spremljati pri tem peptidu. Devet kislih ostankov naredi acetatno sol močno higroskopno; vialo hranite zaprto in v škatli ter pustite, da hladna viala doseže sobno temperaturo, preden zapusti vrečko, da se na steklu ne kondenzira voda.
• Svetloba in kisik: v zaporedju ni oksidabilnega ostanka; običajna zaprta škatla zadostuje.
• Rok uporabnosti: 24 mesecev za zaprto liofilizirano vialo, shranjeno na hladnem; datum na nalepki velja.

Nekaj dni transporta pri sobni temperaturi ne poslabša zaprtega prahu. Pravila za vsako spojino so v liofilizirani peptidi: shranjevanje in rok uporabnosti.

"Thymosin alpha 1" vrne enciklopedične strani, članke v revijah in klinike, preden vrne dobavitelja reagentov. Za laboratorij, ki potrebuje reagent, je pomemben seznam, ki na sami strani odgovori na pet vprašanj.

1. Ali gre za pravo molekulo? 28 ostankov, acetiliran, 3,108.3 g/mol. Ni TB‑500 (889), ni thymalin (mešanica).
2. Ali obstaja serijski COA iz imenovanega neodvisnega laboratorija, preverljiv na spletni strani laboratorija, z HPLC čistostjo, maso 3,108.3 in neto vsebnostjo peptida?
3. Ali COA prikazuje lastno označeno vial dobavitelja in ali se številka serije ujema z vial, ki ga prejmete?
4. Ali vial pošiljajo iz domačega skladišča, s sledenjem, v nekaj dneh? Katalog se pošilja iz Francije (EU) v Evropo.
5. Ali stran opisuje samo reagent (zaporedje, dokumentacijo čistosti, shranjevanje), z navedbo "Samo za raziskovalno uporabo. Ni za človeško ali veterinarsko uporabo."? Dobavitelj, ki objavlja vsebino o uporabi, je dobavitelj, ki ga je enostavno zapreti, in to tveganje pade na kupca, čigar pošiljka je v tranzitu.

Sedemtočkovna metoda je v kako preveriti dobavitelja peptidov; kontrolni seznam za ZDA v kje kupiti raziskovalne peptide v ZDA.