Thymosin alpha-1 (Tα1) peptid: sekvencia, ako je dodávaný, COA, veľkosti

Thymosin alpha-1 (Tα1) je peptid z 28 aminokyselín prvýkrát izolovaný v roku 1977 z teľacieho týmusu skupinou Allana Goldsteina, ktorá frakcionovala týmické extrakty už desať rokov.

Neskôr sa ukázalo, že ide o N-terminálny fragment väčšieho proteínu, protymozínu alfa, a že nesie acetylovú skupinu na svojom N-konci, čo je vlastnosť dôležitá na certifikáte.

Rovnaká sekvencia sa synteticky vyrába od 1980s a je licencovaná v niekoľkých krajinách pod obchodným názvom Zadaxin.

To, čo sa predáva ako tymozín alfa-1 na výskum, je identický 28-zvyškový acetylovaný peptid, vyrobený syntézou na pevnej fáze, purifikovaný preparatívnou HPLC a lyofilizovaný. Len na výskumné použitie.

Nie na ľudské ani veterinárne použitie.

Tri záznamy v katalógu obsahujú slovo "thymosin" alebo "thym-", a kupujúci pravidelne žiadajú o jeden, pričom myslia iný. Sú to tri rôzne objekty.

Alfa a beta tymosíny sú nesúvisiace sekvencie, ktoré boli náhodou izolované z rovnakej prípravy rovnakého tkaniva (thymosin fraction 5, extrakt z teľacieho týmusu prvýkrát pripravený v 1960s), čo je jediný dôvod, prečo zdieľajú názov.

Thymalin je surová frakcia, z ktorej boli izolované.

Záznam, ktorý opisuje thymosin alpha-1 s vlastnosťami TB‑500, alebo ktorý dáva thymalinu jednu molekulovú hmotnosť, zmiešal tieto tri. Sedemzvyškový peptid má svoj vlastný sprievodca: TB‑500 peptid: sekvencia, COA, veľkosti.

N-terminálny serín thymosinu alpha-1 nesie acetylovú skupinu (CH₃CO-), pridanú počas syntézy ako posledný krok na živici. Mení tri veci, ktoré certifikát uvádza.

• Hmotnosť. Acetyl pridáva 42,0 daltonov. „Thymosin alpha-1“, ktorého hmotnosť rekonštruuje na 3 066,3 namiesto 3 108,3, nebol nikdy acetylovaný a je to des-acetyl peptid, odlišná molekula.
• HPLC. Acetylovaný peptid nemá voľnú N-terminálnu aminoskupinu, preto eluuje na reverznej fáze o niečo neskôr ako des-acetyl forma. Neúplná acetylácia sa prejavuje ako malý pík tesne pred hlavným; dobre pripravená šarža ho ukazuje pod 0,5 %.
• Stabilita. Bez voľnej aminoskupiny na N-terminuse nie je peptid substrátom pre aminopeptidázy a nepodlieha N-terminálnym vedľajším reakciám (tvorba diketopiperazínu), ktoré skracujú trvanlivosť niektorých sekvencií. Na polici patrí k lepšie sa správajúcim peptidom svojej veľkosti.

Sekvencia neobsahuje metionín, cysteín ani tryptofán, preto oxidácia nie je problém ako pri sermoreline.

Jeho deväť kyslých rezíduí ho však robí silne hygroskopickým ako acetátovú soľ, preto je uzavretá lahvička pre tento peptid dôležitejšia ako pre väčšinu ostatných.

Čistota HPLC: jeden hlavný pík

Na reverznej fáze HPLC eluuje peptid ako jeden hlavný pík; hodnota čistoty je plocha tohto píku oproti všetkým píkom. Nad 99 % je špecifikácia pre katalógové šarže.

Nečistoty, ktoré treba hľadať, sú des-acetyl peptid (eluujúci tesne pred), delečné sekvencie zo syntézy (reťazec chýba jedno rezídium) a pri peptide s toľkými glutamátovými a aspartátovými rezíduami aspartimidové vedľajšie produkty, ktoré eluujú blízko hlavného píku.

Hmotnostná spektrometria: 3 108,3

Peptid tejto veľkosti a náboja je pri elektrosprejovej ionizácii videný ako viacnásobne nabité ióny, v negatívnom móde rovnako ľahko ako v pozitívnom; správa uvádza pozorované ióny a dekonvoluovanú hmotnosť.

Pre thymosin alpha-1 sú očakávané hodnoty v pozitívnom móde približne m/z 1 037,1 pre [M+3H]³⁺ a 778,1 pre [M+4H]⁴⁺, obe rekonštruujúce na 3 108,3. Dekonvoluovaná hodnota 3 066 je des-acetyl forma.

Čistý obsah peptidu, voda, endotoxín

Čistý obsah (aminokyselinovou analýzou alebo UV) hovorí, koľko z označených miligramov je peptid; so štyrmi bázickými rezíduami na prenos acetátových protiiónov je typických 85 až 90 %, viac ako pri bázickom peptide.

Voda (Karl Fischer) je typicky 3 až 8 % v lyofilizovanom koláči a rýchlo stúpa v otvorenej lahvičke tejto hygroskopickej soli. Endotoxín (LAL, v EU/mg) hovorí, či bola voda a sklo pri plnení čisté.

Čo ešte musí byť na stránke

• Názov laboratória a overiteľné číslo testu (Janoshik Analytical je v tomto trhu referenčný).
• Číslo šarže, rovnaké ako vytlačené na lahvičke.
• Dátum testu a fotografia testovanej lahvičky s etiketou dodávateľa. Certifikát pre holú výrobnú lahvičku nehovorí nič o hotovom produkte.

Certifikáty OXpeptides sú zverejňované podľa šarží v knižnici COA a na stránke produktu thymosin alpha-1, keď sa každá šarža vráti z laboratória. Metóda podľa polí je v ako čítať peptidový COA.

Thymosin alpha-1 je skladovaný v jednej veľkosti, 10 mg: 10 mg peptidu 3.1 kDa predstavuje 3.2 mikromóly.

Karta katalógu na vrchu tejto stránky zobrazuje aktuálnu cenu. Objemové zľavy platia od dvoch lahvičiek (−5 % od 2, −8 % od 3) a cena predplatného platí pre každú dodávku.

Čo cena zahŕňa v OXpeptides: uzavretú, označenú lahvičku z testovanej šarže, jej COA šarže a náhradu, ak zásielka dorazí stratená alebo poškodená. Odosielané z Francúzska (EÚ), sledované: $19, zadarmo od $150.

Pozrite si thymosin alpha-1 v katalógu →

• Teplota: −20 °C na dlhodobé skladovanie; chladnička (2 až 8 °C) na niekoľko týždňov.
• Vlhkosť: bod, na ktorý treba pri tomto peptide dávať pozor. Deväť kyslých rezíduí robí acetátovú soľ silne hygroskopickou; lahvičku udržujte uzavretú a v krabici a nechajte studenú lahvičku dosiahnuť izbovú teplotu predtým, ako opustí vrecko, aby sa na skle nekondenzovala voda.
• Svetlo a kyslík: žiadne oxidovateľné rezídium v sekvencii; zvyčajná uzavretá krabica stačí.
• Trvanlivosť: 24 mesiacov pre uzavretú lyofilizovanú lahvičku skladovanú v chlade; dátum na etikete rozhoduje.

Niekoľko dní pri bežnej preprave nezničí uzavretý prášok. Pravidlá podľa zlúčenín sú v lyofilizované peptidy: skladovanie a trvanlivosť.

„Thymosin alpha 1“ vracia encyklopedické stránky, časopisové články a kliniky skôr, ako vráti dodávateľa výskumných materiálov.

Pre laboratórium, ktoré potrebuje reagent, je dôležitý záznam, ktorý na stránke samotnej odpovedá na päť otázok.

1. Je to správna molekula? 28 zvyškov, acetylovaný, 3,108.3 g/mol. Nie TB‑500 (889), nie thymalin (zmes).
2. Je tu COA šarže z pomenovaného nezávislého laboratória, overiteľného na stránke laboratória, s čistotou HPLC, hmotnosťou 3,108.3 a obsahom čistého peptidu?
3. Zobrazuje COA lahvičku dodávateľa s vlastným označením, a zodpovedá jej číslo šarže lahvičke, ktorú dostanete?
4. Je lahvička odosielaná z domáceho skladu, sledovane, v priebehu niekoľkých dní? Katalóg sa dodáva zo skladu vo Francúzsku (EÚ).
5. Opisuje stránka iba reagent (sekvenciu, dokumentáciu čistoty, skladovanie), s jasne uvedeným „Len na výskumné použitie. Nie na ľudské ani veterinárne použitie.“? Dodávateľ, ktorý zverejňuje obsah o použití, je dodávateľ, ktorý sa dá ľahko zatvoriť, a toto riziko dopadá na kupujúceho, ktorého zásielka je v preprave.

Sedembodová metóda je v ako skontrolovať dodávateľa peptidov; kontrolný zoznam pre USA v kde kúpiť výskumné peptidy v USA.