GHK‑Cu vs AHK‑Cu: porovnanie dvoch meďnatých tripeptidov, atóm po atóme

Keď sa obe sekvencie zarovnajú, rozdiel je jediný uhlík.

• GHK = glycyl-L-histidyl-L-lyzín. Glycín, prvá aminokyselina, má ako bočný reťazec vodík.
• AHK = L-alanyl-L-histidyl-L-lyzín. Alanín má metylovú skupinu (CH₃) tam, kde glycín má vodík.

Táto metylová skupina pridáva 14 Da (CH₂) k hmotnosti a zavádza chirálné centrum na prvej aminokyseline.

Všetko ostatné je rovnaké: histidín v strede, ktorého imidazolový kruh viaže meď, a lyzín na konci. Každý tripeptid je potom komplexovaný s jedným iónom medi(II), čím vznikne GHK‑Cu a AHK‑Cu.

GHK bol izolovaný z plazmy v roku 1973 Lorenom Pickartom, preto má za sebou päťdesiat rokov chémie.

AHK je syntetický analóg, ktorý sa objavil v literatúre kozmetických zložiek v 2000. rokoch. Oba sa dnes vyrábajú tuhou fázovou syntézou; ani jeden nie je extrahovaný z čohokoľvek. Len na výskumné použitie.

Nie na ľudské ani veterinárne použitie.

Riadok o obsahu medi stojí za druhý pohľad. V oboch komplexoch jeden atóm medi (63,5 g/mol) predstavuje približne jednu šestinu hmotnosti.

Vialka „100 mg GHK‑Cu“ teda obsahuje približne 16 mg medi a 84 mg peptidu; záznam, ktorý uvádza hmotnosť tripeptidu bez medi pre meďnatý komplex, sa mýli o 16 %.

Ión medi(II) v GHK‑Cu je viazaný tromi atómami peptidu: dusíkom N-terminálnej aminoskupiny (na glycíne), deprotonovaným dusíkom prvej peptidovej väzby a dusíkom imidazolového kruhu histidínu. Štvrté miesto na medi je obsadené vodou alebo pri vyššej koncentrácii druhou molekulou GHK.

Geometria je okolo medi štvorcová planárna, čo je usporiadanie, ktoré dáva komplexom medi(II) s peptidmi ich modrofialovú farbu.

AHK‑Cu viaže meď rovnakými tromi dusíkmi.

Metylová skupina alanínu sedí na uhlíku vedľa N-terminálnej aminoskupiny, mimo koordinačnej roviny, takže mení bezprostredné okolie medi bez zmeny toho, ktoré atómy ho viažu. Dva dôsledky sú merateľné:

• Farba je rovnaká. Oba prášky sú modrofialové, oba roztoky sú modré. Nič na laboratórnom stole ich nerozlišuje voľným okom.
• Hmotnosť je odlišná. Na hmotnostnom spektre sa voľné ióny tripeptidov objavujú pri 341,2 (GHK, M+H⁺) a 355,2 (AHK, M+H⁺); meď sa pri bežnej ionizácii disociuje, preto certifikát uvádza hmotnosť peptidu a medzera 14 Da je kontrola identity.

Oba komplexy sú stabilné ako suché tuhé látky, ale citlivé na kyslík a svetlo počas dlhých období v roztoku, preto riadok skladovania v oboch záznamoch katalógu pridáva „kyslík“ k obvyklým „svetlo a vlhkosť“.

Pretože oba vyzerajú rovnako, certifikát analýzy je jediný dokument, ktorý kupujúcemu povie, ktorý z nich je vo vialke. Tri riadky túto prácu vykonávajú.

Retenčný čas

Na reverznej fáze HPLC kolóny robí extra metylová skupina AHK mierne hydrofóbnejším, takže AHK‑Cu eluuje o niečo neskôr ako GHK‑Cu pri rovnakom gradiente.

Samotný tento posun je príliš malý na identifikáciu zlúčeniny; stáva sa užitočným, keď laboratórium spustilo oba štandardy, a je dôvodom, prečo dodávateľ, ktorý uvádza oba, musí ukázať samostatný chromatogram pre každý.

Potvrdenie hmotnosti

Rozhodujúci riadok. Pozorovaná hmotnosť zodpovedajúca 340,4 (alebo M+H⁺ pri 341,2) znamená GHK; 354,4 (M+H⁺ pri 355,2) znamená AHK.

Certifikát, ktorý ukazuje hmotnosť GHK na vialke AHK‑Cu, otestoval zlúčeninu nesprávne, alebo vialka obsahuje zlúčeninu nesprávne.

Stanovenie medi

Najlepšie certifikáty pridávajú stanovenie medi (ICP alebo kolorimetrickou metódou) a uvádzajú ho oproti teoretickým 15 až 16 %.

Hodnota medi ďaleko pod touto úrovňou znamená, že vialka obsahuje voľný tripeptid alebo komplex vyrobený s príliš malým množstvom medi a modrá farba bude slabšia, ako sa očakáva.

Málo laboratórií tento riadok štandardne zahŕňa; vyžiadajte si ho pri veľkej objednávke.

Certifikáty OXpeptides sú zverejnené podľa šarže v knižnici COA.

Zostávajúce polia (laboratórium, overiteľné číslo testu, šarža, dátum, foto označenej vialky) sú rovnaké pre každý peptid a čítajú sa v ako čítať peptidový COA; čo percento HPLC hovorí a nehovorí, je v HPLC čistota: čo znamená 99 %.

Toto je najväčší praktický rozdiel medzi týmito dvoma činidlami a je to fakt o dokumentácii, nie o molekulách.

GHK‑Cu je charakterizovaný od roku 1973.

Jeho kryštalická štruktúra, jeho konštanty viazania medi, jeho správanie v modeloch kultivovaných buniek a v skríningoch génovej expresie (Connectivity Map Broad Institute, kde sa objavuje podľa názvu) sú publikované, recenzované a opakovane recenzované.

Recenzia Pickarta a Margolinovej z roku 2018, uvedená nižšie, je štandardným vstupným bodom.

AHK‑Cu má niekoľko málo primárnych prác, väčšinou zo strany kozmetických zložiek a väčšinou v modeloch kultivovaných buniek, z ktorých Shin et al. (2019) je tá, ktorá ho študuje podľa názvu popri GHK‑Cu.

Nie je žiadna recenzia venovaná jemu.

Laboratórium, ktoré potrebuje činidlo s hlbokou publikovanou základňou, si vyberie GHK‑Cu; to, ktoré študuje samotný analóg, si vyberie AHK‑Cu a zvyčajne objedná oba, aby ich spustilo vedľa seba.

Čo z toho kupujúci vyvodí: každý záznam, ktorý opisuje AHK‑Cu literatúrou GHK‑Cu, si požičiava. Obe zlúčeniny sú v štruktúre oddelené jednou metylovou skupinou a v dokumentácii niekoľko stoviek prác.

Katalóg ponúka oba ako lyofilizované prášky v uzavretých 3 mL borosilikátových vialkách s bromobutylovým septum a crimp uzáverom:

GHK‑Cu prichádza vo väčších vialkách, pretože sa vyrába v priemyselnom meradle a stojí menej na výrobu za miligram; AHK‑Cu je syntéza menšieho objemu a začína na 50 mg.

Aktuálne ceny, za vialku a za miligram, sú na dvoch stránkach produktov a otázky z pohľadu nákupu (kontroly dodávateľa, čo cena zahŕňa) sú v sprievodcovi nákupom GHK‑Cu a sprievodcovi nákupom AHK‑Cu.

„Meďnatý peptid“ na trhovisku môže znamenať buď zlúčeninu, zmes oboch, tripeptid bez medi alebo krém obsahujúci zlomok percenta jedného z nich. Štyri otázky to vyriešia:

1. Je sekvencia napísaná? Gly-His-Lys alebo Ala-His-Lys. „Meďnatý peptid“ sám je kategória, nie zlúčenina.
2. Je hmotnosť na certifikáte správna? 340,4 pre GHK, 354,4 pre AHK, na správe z pomenovaného laboratória, ktoré možno vyhľadať.
3. Je prášok modrofialový a je množstvo uvedené v miligramoch? Biely prášok nie je meďnatý komplex; záznam vo fluidných uncách je kozmetika.
4. Opisuje stránka len činidlo? Zloženie, dokumentácia čistoty, skladovanie, „len na výskumné použitie“. Stránka, ktorá opisuje čokoľvek iné, je stránka, ktorú možno stiahnuť s objednávkou v preprave.

Úplná sedembodová metóda je v ako skontrolovať dodávateľa peptidov.