Peptida timozină alfa-1 (Tα1): secvență, mod de furnizare, COA, dimensiuni

Timozina alfa-1 (Tα1) este un peptid de 28 de aminoacizi izolat prima dată în 1977 din timus de vițel de grupul lui Allan Goldstein, care fracționase extracte timice timp de un deceniu.

Ulterior s-a dovedit a fi fragmentul N-terminal al unei proteine mai mari, protimozina alfa, și poartă un grup acetil pe capătul N-terminal, o caracteristică importantă pe un certificat.

Aceeași secvență a fost produsă sintetic începând cu anii 1980 și este licențiată în mai multe țări sub denumirea comercială Zadaxin.

Ceea ce se vinde ca timozină alfa-1 pentru cercetare este peptidul acetilat identic de 28 de resturi, obținut prin sinteză în fază solidă, purificat prin HPLC preparativ și liofilizat. Utilizare doar pentru cercetare.

Nu pentru uz uman sau veterinar.

Trei intrări din catalog conțin cuvântul „timozină” sau „tim-”, iar cumpărătorii cer frecvent unul în timp ce intenționează altul. Sunt trei obiecte diferite.

Timozinele alfa și beta sunt secvențe nerelaționate care au fost izolate din aceeași preparare a aceluiași țesut (fracțiunea timozină 5, un extract de timus de vițel preparat prima dată în anii 1960), singurul motiv pentru care împărtășesc un nume.

Timalinul este fracțiunea brută din care au fost izolate.

O listare care descrie timozina alfa-1 cu proprietățile TB‑500 sau care atribuie timalinului o masă moleculară unică a confundat cele trei. Peptidul de șapte resturi are propriul ghid: Peptida TB‑500: secvență, COA, dimensiuni.

Serina N-terminală a timozinei alfa-1 poartă un grup acetil (CH₃CO-), adăugat în timpul sintezei ca ultim pas pe rășină. Aceasta schimbă trei lucruri raportate pe un certificat.

• Masă. Acetilul adaugă 42,0 daltoni. O „timozină alfa-1” a cărei masă se reconstruiește la 3.066,3 în loc de 3.108,3 nu a fost niciodată acetilată și este peptidul des-acetil, o moleculă diferită.
• HPLC. Peptidul acetilat nu are amină N-terminală liberă, deci eluează ușor mai târziu decât forma des-acetilată pe fază inversă. O acetilare incompletă apare ca un vârf mic imediat înaintea celui principal; un lot bine preparat îl arată sub 0,5 %.
• Stabilitate. Fără o amină liberă la capătul N-terminal, peptidul nu este substrat pentru aminopeptidaze și nu suferă reacțiile laterale N-terminale (formarea de dicetopiperazină) care scurtează durata de valabilitate a unor secvențe. Pe raft este unul dintre peptidele cu cel mai bun comportament din clasa sa de mărime.

Secvența nu conține metionină, cisteină sau triptofan, deci oxidarea nu este problema pe care o reprezintă pentru sermorelin.

Cele nouă resturi acide îl fac totuși puternic higroscopic ca sare de acetat, motiv pentru care un flacon sigilat contează mai mult pentru acest peptid decât pentru majoritatea.

Puritate HPLC: un vârf principal

Pe HPLC în fază inversă peptidul eluează ca un singur vârf principal; cifra de puritate este aria acelui vârf raportată la toate vârfurile.

Peste 99 % este specificația pentru loturile din catalog.

Impuritățile de căutat sunt peptidul des-acetilat (eluat imediat înainte), secvențele de deleție din sinteză (un lanț lipsit de un rest) și, pentru un peptid cu atât de multe resturi de glutamat și aspartat, produșii secundari legați de aspartimidă care eluează aproape de vârful principal.

Spectrometrie de masă: 3.108,3

Un peptid de această mărime și sarcină este văzut prin ionizare electrospray ca ioni multiîncărcați, în mod negativ la fel de ușor ca în mod pozitiv; raportul listează ionii observați și masa deconvoluționată.

Pentru timozina alfa-1 valorile așteptate în mod pozitiv sunt aproximativ m/z 1.037,1 pentru [M+3H]³⁺ și 778,1 pentru [M+4H]⁴⁺, ambele reconstruindu-se la 3.108,3. O masă deconvoluționată de 3.066 este forma des-acetilată.

Conținut net de peptid, apă, endotoxine

Conținutul net (prin analiză de aminoacizi sau UV) indică câte dintre miligramele etichetate sunt peptid; cu doar patru resturi bazice pentru a purta contraioni de acetat, 85 până la 90 % este tipic pentru această secvență, mai ridicat decât pentru un peptid bazic.

Apa (Karl Fischer) este de obicei 3 până la 8 % într-un tort liofilizat și crește rapid într-un flacon deschis al acestei sări higroscopice.

Endotoxinele (LAL, în UE/mg) indică dacă apa și sticlaria de la umplere au fost curate.

Ce altceva trebuie să fie pe pagină

• Numele laboratorului și un număr de test verificabil (Janoshik Analytical este referința pe această piață).
• Numărul de lot, identic cu cel tipărit pe flacon.
• Data testului și o fotografie a flaconului testat purtând eticheta furnizorului. Un certificat pentru un flacon gol de producător nu spune nimic despre produsul finit.

Certificatele OXpeptides sunt publicate pe lot în biblioteca COA și pe pagina produsului timozină alfa-1 pe măsură ce fiecare lot revine de la laborator. Metoda câmp cu câmp se află în cum se citește un COA de peptid.

Timozina alfa-1 este stocată într-o singură dimensiune, 10 mg: 10 mg dintr-un peptid de 3,1 kDa reprezintă 3,2 micromoli.

Cardul din catalog din partea de sus a acestei pagini afișează prețul actual. Se aplică trepte de volum de la două flacoane (−5 % de la 2, −8 % de la 3), iar prețul de abonament se aplică la fiecare livrare.

Ce include prețul la OXpeptides: un flacon sigilat, etichetat, dintr-un lot testat, COA-ul său pe lot și o înlocuire dacă coletul sosește pierdut sau deteriorat. Expediat din Franța (UE), cu urmărire: $19, gratuit de la $150.

Vezi timozina alfa-1 în catalog →

• Temperatură: −20 °C pentru depozitare pe termen lung; un frigider (2 la 8 °C) pentru câteva săptămâni.
• Umiditate: punctul de urmărit pentru acest peptid. Nouă resturi acide fac sarea de acetat puternic higroscopică; păstrați flaconul sigilat și în cutia sa și lăsați un flacon rece să ajungă la temperatura camerei înainte de a ieși din pungă, astfel încât să nu condenseze apă pe sticlă.
• Lumină și oxigen: nici un rest oxidabil în secvență; cutia închisă obișnuită este suficientă.
• Durată de valabilitate: 24 luni pentru un flacon liofilizat sigilat depozitat la rece; data de pe etichetă guvernează.

Câteva zile de transport la temperatura ambiantă nu degradează pulberea sigilată. Regulile compuse pe compus se află în peptide liofilizate: depozitare și durată de valabilitate.

„Thymosin alpha 1” returnează pagini enciclopedice, articole din jurnale și clinici înainte de a returna un furnizor de cercetare.

Pentru un laborator care are nevoie de reactiv, lista care contează răspunde la cinci întrebări pe pagina însăși.

1. Este molecula corectă? 28 reziduuri, acetilat, 3,108.3 g/mol. Nu TB‑500 (889), nu thymalin (un amestec).
2. Există un COA de lot de la un laborator independent numit, verificabil pe site-ul laboratorului, cu puritate HPLC, masa la 3,108.3 și conținut net de peptidă?
3. Arată COA flaconul etichetat al furnizorului, și numărul lotului corespunde cu flaconul pe care îl primiți?
4. Se expediază flaconul din stoc intern, cu urmărire, în câteva zile? Catalogul se expediază din Franța (UE) către Europa.
5. Descrie pagina doar reactivul (secvență, documentație de puritate, stocare), cu „utilizare doar pentru cercetare” menționat clar? Un furnizor care publică conținut de utilizare este un furnizor care este ușor de închis, iar riscul revine cumpărătorului al cărui colet este în tranzit.

Metoda cu șapte puncte este în cum se verifică un furnizor de peptide; lista de verificare la nivel SUA în unde se cumpără peptide de cercetare în SUA.