Timozīna alfa-1 (Tα1) peptīds: secība, piegādes forma, COA, izmēri

Timozīns alfa-1 (Tα1) ir 28 aminoskābju peptīds, pirmo reizi izolēts 1977. gadā no teļa timusa Allana Goldšteina grupas, kas desmit gadus frakcionēja timusa ekstraktus.

Vēlāk izrādījās, ka tas ir lielāka proteīna, protimozīna alfa, N-terminālais fragments un satur acetilgrupu N-terminālā, kas ir svarīga sertifikātā.

Tā pati secība tiek ražota sintētiski kopš 1980. gadiem un ir licencēta vairākās valstīs ar tirdzniecības nosaukumu Zadaxin.

Tas, kas tiek pārdots kā timozīns alfa-1 pētniecībai, ir identisks 28 atlikumu acetilētais peptīds, iegūts ar cietās fāzes sintēzi, attīrīts ar preparatīvo HPLC un liofilizēts. Tikai pētniecības vajadzībām.

Nav paredzēts cilvēku vai veterinārai lietošanai.

Trīs kataloga ieraksti satur vārdu "timozīns" vai "tim-", un pircēji bieži pieprasa vienu, domājot citu. Tie ir trīs dažādi objekti.

Alfa un beta timozīni ir nesaistītas secības, kas tika izolētas no tā paša audu preparāta (timozīna frakcija 5, teļa timusa ekstrakts, pirmo reizi sagatavots 1960. gados), kas ir vienīgais iemesls, kāpēc tiem ir kopīgs nosaukums.

Timalīns ir neattīrīta frakcija, no kuras tie tika izolēti.

Ieraksts, kas apraksta timozīnu alfa-1 ar TB‑500 īpašībām vai piešķir timalīnam vienu molekulāro masu, ir sajaucis trīs. Septiņu atlikumu peptīdam ir sava rokasgrāmata: TB‑500 peptīds: secība, COA, izmēri.

Timozīna alfa-1 N-terminālā serīna satur acetilgrupu (CH₃CO-), kas pievienota sintēzes laikā kā pēdējais solis uz sveķiem. Tas maina trīs lietas, ko ziņo sertifikāts.

• Masa. Acetils pievieno 42,0 daltonus. "Timozīns alfa-1", kura masa rekonstruējas līdz 3,066.3 nevis 3,108.3, nekad nav bijis acetilēts un ir des-acetilēts peptīds, cita molekula.
• HPLC. Acetilētais peptīds nav brīvas N-terminālās amīngrupas, tāpēc tas eluējas nedaudz vēlāk nekā des-acetilētā forma reversajā fāzē. Nepilnīga acetilēšana parādās kā mazs pīķis tieši pirms galvenā; labi izgatavotā partijā tas ir zem 0,5 %.
• Stabilitāte. Bez brīvas amīngrupas N-terminālā peptīds nav substrāts aminopeptidāzēm un neietekmē N-terminālās blakusreakcijas (diketopiperazīna veidošanās), kas saīsina dažu secību glabāšanas laiku. Plauktā tas ir viens no labāk uzvedīgajiem peptīdiem savā izmērā.

Secībā nav metionīna, cisteīna vai triptofāna, tāpēc oksidēšanās nav tāda problēma kā sermorelinam.

Tā deviņi skābie atlikumi padara to stipri higroskopisku kā acetāta sāli, tāpēc noslēgts flakons ir svarīgāks šim peptīdam nekā lielākajai daļai.

HPLC tīrība: viens galvenais pīķis

Reversajā fāzes HPLC peptīds eluējas kā viens galvenais pīķis; tīrības rādītājs ir šī pīķa laukums pret visiem pīķiem. Virs 99 % ir specifikācija kataloga partijām.

Meklējami piemaisījumi ir des-acetilētais peptīds (eluējas tieši pirms), dzēšanas secības no sintēzes (ķēde, kurai trūkst viena atlikuma) un, peptīdam ar tik daudz glutamāta un aspartāta atlikumiem, aspartimīda saistīti blakusprodukti, kas eluējas tuvu galvenajam pīķim.

Masas spektrometrija: 3,108.3

Šāda izmēra un lādiņa peptīds tiek redzēts ar elektrosprauslas jonizāciju kā daudzkārt lādēti joni, negatīvajā režīmā tikpat viegli kā pozitīvajā; ziņojumā uzskaitīti novērotie joni un dekonvolūtā masa.

Timozīnam alfa-1 pozitīvajā režīmā sagaidāmās vērtības ir aptuveni m/z 1,037.1 [M+3H]³⁺ un 778.1 [M+4H]⁴⁺, abi rekonstruējas līdz 3,108.3. Dekonvolūtā 3,066 ir des-acetilētā forma.

Neto peptīdu saturs, ūdens, endotoksīni

Neto saturs (ar aminoskābju analīzi vai UV) norāda, cik no marķētajiem miligramiem ir peptīds; ar tikai četriem bāzes atlikumiem acetāta pretjonu nēsāšanai, 85 līdz 90 % ir tipiski šai secībai, augstāks nekā bāzes peptīdam. Ūdens (Karla Fišera) parasti ir 3 līdz 8 % liofilizētā kūciņā un ātri pieaug atvērtā flakonā šim higroskopiskajam sālim.

Endotoksīns (LAL, EU/mg) norāda, vai ūdens un stikla trauki pildīšanas laikā bija tīri.

Kas vēl jābūt lapā

• Laboratorijas nosaukums un verificējams testa numurs (Janoshik Analytical ir atsauces šajā tirgū).
• Partijas numurs, identisks tam, kas iespiests uz flakona.
• Testa datums un fotogrāfija no testētā flakona ar piegādātāja etiķeti. Sertifikāts tukšam ražotāja flakonam neko nesaka par gatavo produktu.

OXpeptides sertifikāti tiek publicēti katrai partijai COA bibliotēkā un timozīna alfa-1 produktu lapā, kad katra partija atgriežas no laboratorijas. Lauka pa laukam metode ir kā lasīt peptīdu COA.

Timozīns alfa-1 ir noliktavā vienā izmērā, 10 mg: 10 mg no 3,1 kDa peptīda ir 3,2 mikromoli.

Kataloga karte šīs lapas augšdaļā rāda aktuālo cenu. Apjoma līmeņi piemērojas no diviem flakoniem (−5 % no 2, −8 % no 3), un abonēšanas cena attiecas uz katru piegādi.

Ko cena ietver OXpeptides: noslēgtu, marķētu flakonu no testētas partijas, tās partijas COA un nomaiņu, ja sūtījums pazūd vai tiek bojāts. Nosūtīts no Francijas (ES), ar izsekošanu: $19, bez maksas no $150.

Skatīt timozīnu alfa-1 katalogā →

• Temperatūra: −20 °C ilgtermiņa uzglabāšanai; ledusskapis (2 līdz 8 °C) dažām nedēļām.
• Mitruma: punkts, ko uzraudzīt šim peptīdam. Deviņi skābie atlikumi padara acetāta sāli stipri higroskopisku; flakonu turēt noslēgtu un kastē, un ļaut aukstam flakonam sasniegt istabas temperatūru pirms izņemšanas no maisa, lai uz stikla nekondensētos ūdens.
• Gaisma un skābeklis: secībā nav oksidējamu atlikumu; parasta slēgta kaste ir pietiekama.
• Glabāšanas laiks: 24 mēneši noslēgtam liofilizētam flakonam, kas uzglabāts auksti; datums uz etiķetes nosaka.

Dažas dienas apkārtējās vides transportā nedegradē noslēgto pulveri. Noteikumi pa savienojumiem ir liofilizētie peptīdi: uzglabāšana un glabāšanas laiks.

"Thymosin alpha 1" atgriež enciklopēdijas lapas, žurnālu rakstus un klīnikas, pirms tas atgriež pētniecības piegādātāju. Laboratorijai, kurai nepieciešams reaģents, saraksts, kas ir svarīgs, atbild uz piecām jautājumiem pašā lapā.

1. Vai tas ir pareizā molekula? 28 atlikumi, acetilēts, 3,108.3 g/mol. Nav TB‑500 (889), nav thymalin (maisījums).
2. Vai ir partijas COA no nosaukta neatkarīga laboratorija, verificējams laboratorijas vietnē, ar HPLC tīrību, masu 3,108.3 un neto peptīdu saturu?
3. Vai COA parāda piegādātāja paša marķēto flakonu, un vai tā partijas numurs sakrīt ar flakonu, ko saņemat?
4. Vai flakons tiek nosūtīts no vietējā krājuma, ar izsekošanu, dažu dienu laikā? Katalogs tiek nosūtīts no Francijas uz Eiropu.
5. Vai lapa apraksta tikai reaģentu (sekvenci, tīrības dokumentāciju, uzglabāšanu), ar "Tikai pētniecības vajadzībām. Nav paredzēts cilvēku vai veterinārai lietošanai." skaidri norādītu? Piegādātājs, kas publicē lietošanas saturu, ir piegādātājs, kuru ir viegli slēgt, un šis risks gulstas uz pircēju, kura sūtījums ir tranzītā.

Septiņu punktu metode ir kā pārbaudīt peptīdu piegādātāju; ASV mēroga kontrolsaraksts ir kur iegādāties pētniecības peptīdus ASV.