Timozinas alfa-1 (Tα1) peptidas: seka, kaip jis tiekiamas, COA, dydžiai

Timozinas alfa-1 (Tα1) yra 28 aminorūgščių peptidas, pirmą kartą išskirtas 1977 m. iš veršelio timuso Allano Goldsteino grupės, kuri dešimtmetį frakcionavo timuso ekstraktus.

Vėliau paaiškėjo, kad tai yra didesnio baltymo protimozino alfa N-galinis fragmentas ir kad jis turi acetilo grupę N-galyje, o tai svarbu sertifikate.

Ta pati seka sintetiškai gaminama nuo 1980-ųjų ir licencijuota keliose šalyse prekių ženklu Zadaxin.

Tyrimams parduodamas timozinas alfa-1 yra identiškas 28 liekanų acetiliuotas peptidas, pagamintas kietosios fazės sintezės būdu, išgrynintas preparacine HPLC ir liofilizuotas. Tik tyrimų naudojimui.

Ne žmonėms ar veterinariniam naudojimui.

Trys katalogo įrašai turi žodį „timozinas“ arba „tim-“, o pirkėjai dažnai prašo vieno, turėdami omenyje kitą. Tai trys skirtingi objektai.

Alfa ir beta timozinai yra nesusijusios sekos, kurios atsitiktinai buvo išskirtos iš to paties audinio preparato (timozino frakcija 5, veršelio timuso ekstraktas, pirmą kartą paruoštas 1960-aisiais), todėl jos dalijasi pavadinimu.

Timalinas yra žalia frakcija, iš kurios jie buvo išskirti.

Sąrašas, aprašantis timoziną alfa-1 TB‑500 savybėmis arba suteikiantis timalinui vieną molekulinę masę, supainiojo tris objektus. Septynių liekanų peptidas turi savo vadovą: TB‑500 peptidas: seka, COA, dydžiai.

Timozino alfa-1 N-galinis serinas turi acetilo grupę (CH₃CO-), pridėtą sintezės metu kaip paskutinį žingsnį ant dervos. Tai keičia tris dalykus, kuriuos rodo sertifikatas.

• Masė. Acetilas prideda 42,0 daltonų. „Timozinas alfa-1“, kurio masė rekonstruojama į 3 066,3 vietoj 3 108,3, niekada nebuvo acetiliuotas ir yra des-acetilo peptidas, kita molekulė.
• HPLC. Acetiliuotas peptidas neturi laisvos N-galinės amino grupės, todėl atvirkštinės fazės chromatografijoje eliuuojasi šiek tiek vėliau nei des-acetilo forma. Nepilna acetiliacija rodoma kaip maža smailė prieš pagrindinę; gerai pagamintoje partijoje ji yra žemiau 0,5 %.
• Stabilumas. Be laisvos amino grupės N-galyje, peptidas nėra aminopeptidazių substratas ir nepatiria N-galinio šalutinio reakcijų (diketopiperazino susidarymo), kurios sutrumpina kai kurių sekų galiojimo laiką. Lentynoje tai yra vienas geriau besielgiančių peptidų savo dydžio.

Sekoje nėra metionino, cisteino ar triptofano, todėl oksidacija nėra tokia problema kaip sermorelinui.

Devynios rūgštinės liekanos daro jį stipriai higroskopišką kaip acetato druską, todėl sandarus buteliukas šiam peptidui yra svarbesnis nei daugumai kitų.

HPLC grynumas: viena pagrindinė smailė

Atvirkštinės fazės HPLC peptidas eliuuojasi kaip viena pagrindinė smailė; grynumo rodiklis yra tos smailės plotas, palyginti su visomis smailėmis.

Virš 99 % yra katalogo partijų specifikacija.

Priemaišos, kurių reikia ieškoti: des-acetilo peptidas (eliuojasi prieš pat), sintezės metu atsiradusios delecijos sekos (grandinė, kurioje trūksta vienos liekanos) ir, esant tiek daug glutamato ir aspartato liekanų, aspartimido susiję šalutiniai produktai, kurie eliuuojasi arti pagrindinės smailės.

Masės spektrometrija: 3 108,3

Tokio dydžio ir krūvio peptidas elektrosprejiniu jonizavimu matomas kaip daugkartiniai įkrauti jonai, neigiamu režimu taip pat lengvai kaip teigiamu; ataskaitoje išvardijami stebimi jonai ir dekonvoliuota masė.

Timozinui alfa-1 teigiamu režimu tikėtinos vertės yra maždaug m/z 1 037,1 [M+3H]³⁺ ir 778,1 [M+4H]⁴⁺, abi rekonstruojančios į 3 108,3. Dekonvoliuota 3 066 yra des-acetilo forma.

Grynasis peptidų kiekis, vanduo, endotoksinai

Grynasis kiekis (aminorūgščių analize arba UV) rodo, kiek iš pažymėtų miligramų yra peptido; turint tik keturias bazines liekanas acetato priešjonams, 85–90 % yra tipiška šiai sekai, daugiau nei baziniam peptidui.

Vanduo (Karl Fischer) paprastai yra 3–8 % liofilizuotoje masėje ir greitai didėja atidarytame šios higroskopiškos druskos buteliuke. Endotoksinas (LAL, EU/mg) rodo, ar užpildymo vanduo ir stiklo indai buvo švarūs.

Kas dar turi būti puslapyje

• Laboratorijos pavadinimas ir patikrinamas bandymo numeris (Janoshik Analytical yra šios rinkos etalonas).
• Partijos numeris, identiškas atspausdintam ant buteliuko.
• Bandymo data ir fotografija bandyto buteliuko su tiekėjo etikete. Sertifikatas pliko gamintojo buteliuko nieko nesako apie gatavą produktą.

OXpeptides sertifikatai skelbiami kiekvienai partijai COA bibliotekoje ir timozino alfa-1 produkto puslapyje, kai kiekviena partija grįžta iš laboratorijos. Lauko po lauko metodas yra kaip skaityti peptido COA.

Timozinas alfa-1 laikomas vienu dydžiu, 10 mg: 10 mg 3,1 kDa peptido yra 3,2 mikromoliai.

Katalogo kortelė šio puslapio viršuje rodo esamą kainą. Tūrio pakopos taikomos nuo dviejų buteliukų (−5 % nuo 2, −8 % nuo 3), o prenumeratos kaina taikoma kiekvienam pristatymui.

Ką kaina apima OXpeptides: sandarų, paženklintą buteliuką iš patikrintos partijos, jo partijos COA ir pakeitimą, jei siuntinys pametamas ar sugadinamas. Pristatoma iš Prancūzijos (ES), su sekimo numeriu: $19, nemokamai nuo $150.

Žiūrėti timoziną alfa-1 kataloge →

• Temperatūra: −20 °C ilgalaikiam laikymui; šaldytuvas (2–8 °C) kelioms savaitėms.
• Drėgmė: tai, ką reikia stebėti šiam peptidui. Devynios rūgštinės liekanos daro acetato druską stipriai higroskopišką; buteliuką laikykite sandarų ir dėžutėje, o šaltą buteliuką leiskite pasiekti kambario temperatūrą prieš išimdami iš maišelio, kad ant stiklo nesikondensuotų vanduo.
• Šviesa ir deguonis: sekoje nėra oksiduojamų liekanų; įprastos uždaros dėžutės pakanka.
• Galiojimo laikas: 24 mėnesiai sandariam liofilizuotam buteliukui, laikomam šaltai; data etiketėje yra lemiama.

Kelios dienos aplinkos temperatūroje siunčiant nesugadina sandaraus miltelio. Junginių taisyklės yra liofilizuoti peptidai: laikymas ir galiojimo laikas.

„Thymosin alpha 1“ grąžina enciklopedinius puslapius, žurnalo straipsnius ir klinikas, kol grąžina tyrimų tiekėją. Laboratorijai, kuriai reikia reagento, sąrašas, kuris svarbus, atsako į penkis klausimus pačiame puslapyje.

1. Ar tai tinkama molekulė? 28 liekanos, acetiliuota, 3,108.3 g/mol. Ne TB‑500 (889), ne thymalin (mišinys).
2. Ar yra partijos COA iš įvardinto nepriklausomo laboratorijos, patikrinamo laboratorijos svetainėje, su HPLC grynumu, mase 3,108.3 ir gryno peptido kiekiu?
3. Ar COA rodo tiekėjo paties pažymėtą buteliuką, ir ar jo partijos numeris atitinka buteliuką, kurį gaunate?
4. Ar buteliukas siunčiamas iš vietinio sandėlio, sekamas, per kelias dienas? Katalogas siunčiamas iš Prancūzijos (ES) į Europą.
5. Ar puslapis aprašo tik reagentą (seką, grynumo dokumentaciją, saugojimą), su „Tik tyrimų naudojimui. Ne žmonėms ar veterinariniam naudojimui.“ aiškiai nurodyta? Tiekėjas, kuris skelbia naudojimo turinį, yra tiekėjas, kurį lengva uždaryti, ir ta rizika tenka pirkėjui, kurio siunta yra tranzitu.

Septynių punktų metodas yra kaip patikrinti peptidų tiekėją; JAV masto kontrolinis sąrašas kur pirkti tyrimų peptidus JAV.