Timozin alfa-1 (Tα1) peptid: szekvencia, kiszerelés, COA, méretek

Timozin alfa-1 (Tα1) egy 28 aminosavból álló peptid, amelyet 1977-ben izoláltak először borjú timuszból Allan Goldstein csoportja, akik egy évtizeden át frakcionálták a timikus kivonatokat.

Később kiderült, hogy a nagyobb fehérje, a protimozin alfa N-terminális fragmentuma, és acetilcsoportot hordoz az N-terminálison, ami a tanúsítványon is szerepel.

Ugyanezt a szekvenciát az 1980-as évek óta szintetikusan állítják elő, és több országban a Zadaxin kereskedelmi néven engedélyezték.

A kutatáshoz értékesített timozin alfa-1 azonos a 28 maradékos acetilezett peptiddel, amelyet szilárdfázisú szintézissel állítanak elő, preparatív HPLC-vel tisztítanak és fagyasztva szárítanak. Kizárólag kutatási célra.

Nem emberi vagy állatorvosi használatra.

Három katalógustétel tartalmazza a „timozin” vagy „tim-” szót, és a vásárlók gyakran kérnek egyet, miközben másikat értenek. Három különböző tárgyról van szó.

Az alfa és béta timozinok egymással nem rokon szekvenciák, amelyeket ugyanabból a szöveti preparátumból (timozin frakció 5, az 1960-as években először előállított borjú-timusz kivonat) izoláltak, ezért osztoznak a néven.

A timalin az a nyers frakció, amelyből izolálták őket.

Az a lista, amely a timozin alfa-1-et a TB‑500 tulajdonságaival írja le, vagy a timalinnak egyetlen molekulatömeget ad, összekeverte a hármat. A hét maradékos peptidnek saját útmutatója van: TB‑500 peptid: szekvencia, COA, méretek.

A timozin alfa-1 N-terminális szerinje acetilcsoportot (CH₃CO-) hordoz, amelyet a szintézis utolsó lépéseként adtak hozzá a gyantán. Ez három dolgot változtat meg, amit a tanúsítvány jelent.

• Tömeg. Az acetil 42,0 daltonnal növeli a tömeget. Az a „timozin alfa-1”, amelynek tömege 3 066,3-re rekonstruálható ahelyett, hogy 3 108,3 lenne, soha nem volt acetilezve, és a des-acetil peptid, egy másik molekula.
• HPLC. Az acetilezett peptidnek nincs szabad N-terminális aminja, ezért fordított fázisban kissé később eluál, mint a des-acetil forma. A hiányos acetilezés kis csúcsként jelenik meg közvetlenül a főcsúcs előtt; egy jól elkészített tételnél ez 0,5 % alatt van.
• Stabilitás. N-terminálisan szabad amin hiányában a peptid nem szubsztrátja az aminopeptidázoknak, és nem megy végbe azok az N-terminális mellékreakciók (diketopiperazin képződés), amelyek egyes szekvenciák eltarthatóságát rövidítik. Polcon ez a méretű peptidek közül a jobban viselkedőek közé tartozik.

A szekvencia nem tartalmaz metionint, ciszteint vagy triptofánt, ezért az oxidáció nem jelent akkora gondot, mint a szermorelin esetében.

Kilenc savas maradéka miatt az acetát só erősen higroszkópos, ezért ennél a peptidnél a lezárt fiola fontosabb, mint a legtöbb esetében.

HPLC tisztaság: egy főcsúcs

Fordított fázisú HPLC-n a peptid egyetlen főcsúcsként eluál; a tisztasági érték ennek a csúcsnak a területe az összes csúcshoz képest. A katalógus tételeknél a specifikáció 99 % feletti.

A keresendő szennyezők a des-acetil peptid (közvetlenül előtte eluál), a szintézisből származó deléciós szekvenciák (egy maradékot hiányzó lánc) és ennyi glutamát- és aszpartát-maradékkal az aszpartimidhez kapcsolódó melléktermékek, amelyek a főcsúcs közelében eluálnak.

Tömegspektrometria: 3 108,3

Ennek a méretű és töltésű peptidnek elektrospray ionizációval többszörösen töltött ionjai láthatók, negatív módban is könnyen, mint pozitívban; a jelentés felsorolja a megfigyelt ionokat és a dekonvolúciós tömeget.

Timozin alfa-1 esetén pozitív módban a várható értékek kb. m/z 1 037,1 [M+3H]³⁺ és 778,1 [M+4H]⁴⁺, mindkettő 3 108,3-ra rekonstruálódik. A 3 066-os dekonvolúciós érték a des-acetil forma.

Nettó peptidtartalom, víz, endotoxin

A nettó tartalom (aminosav-analízissel vagy UV-val) megmondja, hogy a címkézett milligrammok közül hány peptid; csak négy bázikus maradékkal, amely acetát ellenionokat hordoz, 85–90 % tipikus erre a szekvenciára, magasabb, mint egy bázikus peptidnél.

A víz (Karl Fischer) liofilizált tortában általában 3–8 %, és ebben a higroszkópos sóban gyorsan emelkedik a nyitott fiolában.

Az endotoxin (LAL, EU/mg) azt jelzi, hogy a töltéshez használt víz és üvegeszköz tiszta volt-e.

Mi másnak kell szerepelnie az oldalon

• A laboratórium neve és ellenőrizhető vizsgálati szám (ezen a piacon a Janoshik Analytical a referencia).
• A tételszám, azonos a fiolán nyomtatottal.
• A vizsgálat dátuma és a vizsgált fiola fényképe a szállító címkéjével. A csupasz gyártói fiolára kiállított tanúsítvány semmit sem mond a késztermékről.

Az OXpeptides tanúsítványait tételenként közzéteszik a COA könyvtárban és a timozin alfa-1 termékoldalon, amint minden tétel visszakerül a laboratóriumból. A mezőnkénti módszert lásd a hogyan olvassuk a peptid COA-t oldalon.

A timozin alfa-1 egy méretben, 10 mg-ban van raktáron: 3,1 kDa peptidből 10 mg 3,2 mikromol.

Az oldal tetején lévő katalóguskártya az aktuális árat mutatja. Mennyiségi kedvezmények két fiolától (−5 % 2-től, −8 % 3-tól), és az előfizetési ár minden szállításra vonatkozik.

Az ár az OXpeptidesnél tartalmazza: lezárt, címkézett fiolát vizsgált tételből, annak tételes COA-ját, valamint cserét, ha a csomag elveszik vagy megsérül.

Franciaországból (EU) szállítva, nyomon követve: $19, ingyenes $150 felett.

Lásd a timozin alfa-1-et a katalógusban →

• Hőmérséklet: −20 °C hosszú távú tároláshoz; hűtőszekrény (2–8 °C) néhány hétre.
• Nedvesség: ennél a peptidnél erre kell figyelni. Kilenc savas maradék miatt az acetát só erősen higroszkópos; a fiolát lezárva és dobozában kell tartani, és a hideg fiolát szobahőmérsékletre kell engedni, mielőtt kiveszi a zacskóból, hogy ne csapódjon víz az üvegre.
• Fény és oxigén: a szekvenciában nincs oxidálható maradék; a szokásos zárt doboz elegendő.
• Eltarthatóság: 24 hónap lezárt liofilizált fiolára, hidegen tárolva; a címkén lévő dátum a mérvadó.

Néhány napos környezeti hőmérsékletű szállítás nem rontja a lezárt port. A vegyületenkénti szabályok a liofilizált peptidek: tárolás és eltarthatóság oldalon találhatók.

"Thymosin alpha 1" enciklopédikus oldalakat, folyóiratcikkeket és klinikákat ad vissza, mielőtt egy kutatási beszállítót.

Egy laboratóriumnak, amelyiknek a reagensre van szüksége, az a lista számít, amelyik öt kérdésre válaszol magán az oldalon.

1. Ez a megfelelő molekula? 28 maradék, acetilezett, 3,108.3 g/mol. Nem TB‑500 (889), nem thymalin (egy keverék).
2. Van-e tétel COA egy megnevezett független laboratóriumtól, ellenőrizhető a labor webhelyén, HPLC tisztasággal, a tömeg 3,108.3 és nettó peptidtartalommal?
3. Mutatja-e a COA a beszállító saját címkézett fioláját, és egyezik-e a lot száma a kapott fiolával?
4. Szállít a fiola belföldi készletből, nyomon követhetően, néhány nap alatt? A katalógus Franciaországból (EU) szállít Európába.
5. Csak a reagenst írja le az oldal (szekvencia, tisztasági dokumentáció, tárolás), a "Kizárólag kutatási célra. Nem emberi vagy állatorvosi használatra." egyértelműen feltüntetve? Egy olyan beszállító, amelyik felhasználási tartalmat tesz közzé, könnyen bezárható, és ez a kockázat a vevőre hárul, akinek a csomagja úton van.

A hétpontos módszer a hogyan ellenőrizhető egy peptid beszállító cikkben; az Egyesült Államok-szerte érvényes ellenőrzőlista a hol vásárolhatók kutatási peptidek az USA-ban cikkben.