GHK‑Cu vs AHK‑Cu: usporedba dvaju bakrenih tripeptida, atom po atom

Poravnaju li se dvije sekvence, razlika je jedan ugljikov atom.

• GHK = glicil-L-histidil-L-lizin. Glicin, prvi ostatak, ima vodik kao bočni lanac.
• AHK = L-alanil-L-histidil-L-lizin. Alanin ima metilnu skupinu (CH₃) tamo gdje glicin ima vodik.

Ta metilna skupina dodaje 14 Da (CH₂) masi i uvodi kiralni centar na prvom ostatku.

Sve ostalo je identično: histidin u sredini, čiji imidazolni prsten veže bakar, i lizin na kraju. Svaki tripeptid zatim se kompleksira s jednim ionom bakra(II) dajući GHK‑Cu i AHK‑Cu.

GHK je izoliran iz plazme 1973. godine od strane Lorena Pickarta, zbog čega ima pedeset godina kemije iza sebe.

AHK je sintetski analog koji se pojavio u literaturi kozmetičkih sastojaka 2000-ih. Oba se danas proizvode čvrstofaznom sintezom; nijedan se ne ekstrahira iz bilo čega. Samo za istraživačku upotrebu.

Nije za ljudsku ili veterinarsku upotrebu.

Linija sadržaja bakra vrijedi drugog pogleda. U oba kompleksa jedan atom bakra (63,5 g/mol) čini oko jedne šestine mase.

Bočica „100 mg GHK‑Cu“ stoga sadrži oko 16 mg bakra i 84 mg peptida; navod koji navodi masu tripeptida bez bakra za bakreni kompleks pogrešno je izračunao za 16 %.

Ion bakra(II) u GHK‑Cu vezan je trima atomima peptida: dušikom N-terminalne amine (na glicinu), deprotoniranim dušikom prve peptidne veze i dušikom imidazolnog prstena histidina. Četvrto mjesto na bakru zauzima voda ili, pri višoj koncentraciji, druga molekula GHK.

Geometrija je kvadratno-planarna oko bakra, što je raspored koji daje bakrenim(II) peptidnim kompleksima plavo-ljubičastu boju.

AHK‑Cu veže bakar kroz ista tri dušika.

Metilna skupina alanina nalazi se na ugljiku uz N-terminalnu aminu, izvan koordinacijske ravnine, pa mijenja neposredno okruženje bakra bez promjene atoma koji ga vežu. Dvije posljedice su mjerljive:

• Boja je ista. Oba praha su plavo-ljubičasta, obje otopine su plave. Ništa na stolu ne razlikuje ih okom.
• Masa je različita. Na masenom spektru ioni slobodnih tripeptida pojavljuju se na 341,2 (GHK, M+H⁺) i 355,2 (AHK, M+H⁺); bakar se disocira pri uobičajenoj ionizaciji, pa certifikat prijavljuje masu peptida, a razmak od 14 Da je provjera identiteta.

Oba kompleksa stabilna su kao suhe krute tvari, ali osjetljiva su na kisik i svjetlo tijekom dugih razdoblja u otopini, zbog čega linija skladištenja oba unosa u katalog dodaje „kisik“ uobičajenim „svjetlu i vlazi“.

Budući da su dva identična na pogled, certifikat analize jedini je dokument koji kupcu govori koji se nalazi u bočici. Tri linije obavljaju posao.

Vrijeme zadržavanja

Na reverzno-faznom HPLC stupcu dodatna metilna skupina čini AHK nešto hidrofobnijim, pa AHK‑Cu eluira malo kasnije od GHK‑Cu pod istim gradijentom.

Sam po sebi, taj pomak premalen je da identificira spoj; postaje koristan kada je laboratorij proveo oba standarda, i razlog je zašto dobavljač koji navodi oba mora prikazati zaseban kromatogram za svaki.

Potvrda mase

Odlučujuća linija. Promatrana masa dosljedna s 340,4 (ili M+H⁺ na 341,2) znači GHK; 354,4 (M+H⁺ na 355,2) znači AHK. Certifikat koji prikazuje masu GHK na bočici AHK‑Cu testirao je krivi spoj ili bočica sadrži krivi spoj.

Određivanje bakra

Najbolji certifikati dodaju određivanje bakra (ICP-om ili kolorimetrijskom metodom) i prijavljuju ga prema teorijskih 15 do 16 %.

Očitanje bakra daleko ispod toga znači da bočica sadrži slobodni tripeptid ili kompleks načinjen s premalo bakra, a plava boja bit će slabija od očekivane.

Malo laboratorija uključuje ovu liniju prema zadanim postavkama; zatražite je pri većoj narudžbi.

OXpeptides certifikati objavljuju se po lotu u biblioteci COA.

Preostala polja (laboratorij, provjerljiv broj testa, lot, datum, fotografija označene bočice) ista su za svaki peptid i čitaju se u kako čitati peptidni COA; što HPLC postotak čini i ne čini je u HPLC čistoća: što 99 % znači.

Ovo je najveća praktična razlika između dva reagensa i činjenica je o dokumentaciji, ne o molekulama.

GHK‑Cu karakteriziran je od 1973.

Njegova kristalna struktura, konstante vezanja bakra, ponašanje u modelima kultiviranih stanica i u ekranima ekspresije gena (Broad Institute Connectivity Map, gdje se pojavljuje po imenu) objavljeni su, pregledani i ponovno pregledani.

Pickart i Margolina 2018. pregled, naveden u nastavku, standardna je ulazna točka.

AHK‑Cu ima nekoliko primarnih radova, većinom s kozmetičke strane sastojaka i većinom u modelima kultiviranih stanica, od kojih je Shin et al. (2019) onaj koji ga proučava po imenu uz GHK‑Cu.

Nema posvećenog pregleda. Laboratorij kojem treba reagens s dubokom objavljenom osnovom bira GHK‑Cu; onaj koji proučava sam analog bira AHK‑Cu i obično naručuje oba da ih pokrene usporedno.

Što kupac iz toga uzima: svaki navod koji opisuje AHK‑Cu literaturom GHK‑Cu posuđuje. Dva spoja razmaknuta su jednom metilnom skupinom u strukturi i nekoliko stotina radova u dokumentaciji.

Katalog nudi oba kao liofilizirane prahove u zatvorenim 3 mL borosilikatnim bočicama s bromobutilnim septumom i krimp kapom:

GHK‑Cu dolazi u većim bočicama jer se proizvodi u industrijskom opsegu i košta manje po miligramu za proizvodnju; AHK‑Cu je sinteza manjeg volumena i počinje od 50 mg. Žive cijene, po bočici i po miligramu, nalaze se na dvije stranice proizvoda, a pitanja s kupovne strane (provjere dobavljača, što cijena uključuje) u vodiču za kupnju GHK‑Cu i vodiču za kupnju AHK‑Cu.

„Bakreni peptid“ na tržištu može značiti bilo koji spoj, smjesu oba, tripeptid bez bakra ili kremu koja sadrži djelić postotka jednog od njih. Četiri pitanja to rješavaju:

1. Je li sekvenca napisana? Gly-His-Lys ili Ala-His-Lys. „Bakreni peptid“ sam po sebi je kategorija, ne spoj.
2. Je li masa na certifikatu ona prava? 340,4 za GHK, 354,4 za AHK, na izvješću imenovanog laboratorija koji se može potražiti.
3. Je li prah plavo-ljubičast i je li količina navedena u miligramima? Bijeli prah nije bakreni kompleks; navod u tekućim uncama je kozmetika.
4. Opisuje li stranica samo reagens? Sastav, dokumentacija čistoće, skladištenje, „samo za istraživačku upotrebu“. Stranica koja opisuje bilo što drugo stranica je koja se može skinuti s narudžbom u tranzitu.

Potpuna sedamtočkovna metoda nalazi se u kako provjeriti dobavljača peptida.