GHK‑Cu vs AHK‑Cu : les deux tripeptides de cuivre comparés, atome par atome

Aligner les deux séquences et la différence tient en un seul carbone.

• GHK = glycyl-L-histidyl-L-lysine. La glycine, premier résidu, a un hydrogène comme chaîne latérale.
• AHK = L-alanyl-L-histidyl-L-lysine. L'alanine a un groupe méthyle (CH₃) là où la glycine a un hydrogène.

Ce groupe méthyle ajoute 14 Da (CH₂) à la masse et introduit un centre chiral au premier résidu.

Tout le reste est identique : l'histidine au milieu, dont le cycle imidazole lie le cuivre, et la lysine à l'extrémité. Chaque tripeptide est ensuite complexé avec un ion cuivre(II) pour donner GHK‑Cu et AHK‑Cu.

GHK a été isolé du plasma en 1973 par Loren Pickart, ce qui explique ses cinquante ans de chimie.

AHK est un analogue synthétique apparu dans la littérature des ingrédients cosmétiques dans les années 2000. Les deux sont aujourd'hui fabriqués par synthèse en phase solide ; aucun n'est extrait de quoi que ce soit.

Usage recherche uniquement. Pas pour usage humain ou vétérinaire.

La ligne sur la teneur en cuivre mérite un second regard. Dans les deux complexes, un seul atome de cuivre (63,5 g/mol) représente environ un sixième de la masse.

Un flacon de « 100 mg GHK‑Cu » contient donc environ 16 mg de cuivre et 84 mg de peptide ; une liste qui cite la masse du tripeptide sans cuivre pour un complexe de cuivre a commis une erreur de 16 %.

L’ion cuivre(II) dans GHK‑Cu est lié par trois atomes du peptide : l’azote de l’amine N-terminale (sur la glycine), l’azote déprotoné de la première liaison peptidique et un azote du cycle imidazole de l’histidine.

Un quatrième site sur le cuivre est occupé par de l’eau ou, à plus forte concentration, par une seconde molécule de GHK.

La géométrie est plane carrée autour du cuivre, ce qui est l’arrangement qui donne aux complexes peptidiques de cuivre(II) leur couleur bleu-violet.

AHK‑Cu lie le cuivre par les mêmes trois azotes.

Le groupe méthyle de l’alanine se trouve sur le carbone voisin de l’amine N-terminale, hors du plan de coordination, de sorte qu’il modifie l’environnement immédiat du cuivre sans changer quels atomes le lient.

Deux conséquences sont mesurables :

• La couleur est la même. Les deux poudres sont bleu-violet, les deux solutions sont bleues. Rien sur un banc ne permet de les distinguer à l’œil.
• La masse est différente. Sur un spectre de masse, les ions tripeptidiques libres apparaissent à 341.2 (GHK, M+H⁺) et 355.2 (AHK, M+H⁺) ; le cuivre se dissocie sous l’ionisation habituelle, donc le certificat indique la masse du peptide et l’écart de 14 Da constitue le contrôle d’identité.

Les deux complexes sont stables à l’état solide sec mais sensibles à l’oxygène et à la lumière sur de longues périodes en solution, c’est pourquoi la ligne de stockage des deux fiches catalogue ajoute « oxygène » aux habituels « lumière et humidité ».

Parce que les deux sont identiques en apparence, le certificat d'analyse est le seul document qui indique à l'acheteur lequel se trouve dans le flacon. Trois lignes accomplissent ce travail.

Temps de rétention

Sur une colonne HPLC en phase inverse, le groupe méthyle supplémentaire rend l'AHK légèrement plus hydrophobe, donc l'AHK‑Cu élue un peu plus tard que le GHK‑Cu sous le même gradient.

En soi, ce décalage est trop faible pour identifier un composé ; il devient utile lorsque le laboratoire a analysé les deux standards, et c'est la raison pour laquelle un fournisseur qui liste les deux doit montrer un chromatogramme séparé pour chacun.

Confirmation de masse

La ligne décisive. Une masse observée cohérente avec 340.4 (ou un M+H⁺ à 341.2) signifie GHK ; 354.4 (M+H⁺ à 355.2) signifie AHK.

Un certificat qui montre la masse du GHK sur un flacon d'AHK‑Cu a testé le mauvais composé, ou le flacon contient le mauvais composé.

Détermination du cuivre

Les meilleurs certificats ajoutent une détermination du cuivre (par ICP ou une méthode colorimétrique) et la rapportent par rapport à la valeur théorique de 15 à 16 %.

Une lecture du cuivre bien en dessous de cela signifie que le flacon contient le tripeptide libre, ou un complexe fabriqué avec trop peu de cuivre, et la couleur bleue sera plus faible que prévu.

Peu de laboratoires incluent cette ligne par défaut ; demandez-la pour une commande importante.

Les certificats d'OXpeptides sont publiés par lot dans la bibliothèque de COA.

Les champs restants (laboratoire, numéro de test vérifiable, lot, date, photo du flacon étiqueté) sont les mêmes pour chaque peptide et sont lus dans comment lire un COA de peptide ; ce que le pourcentage HPLC dit et ne dit pas est dans pureté HPLC : ce que signifie 99 %.

C'est la plus grande différence pratique entre les deux réactifs, et c'est un fait sur la documentation, pas sur les molécules.

GHK‑Cu est caractérisé depuis 1973.

Sa structure cristalline, ses constantes de liaison au cuivre, son comportement dans des modèles de cellules cultivées et dans des criblages d'expression génique (la Connectivity Map de l'Institut Broad, où il apparaît par son nom) sont publiés, examinés et réexaminés.

La revue de Pickart et Margolina de 2018, listée ci-dessous, est le point d'entrée standard.

AHK‑Cu a quelques articles primaires, la plupart du côté des ingrédients cosmétiques et la plupart dans des modèles de cellules cultivées, dont Shin et al.

(2019) est celui qui l'étudie par son nom aux côtés de GHK‑Cu. Il n'existe aucune revue qui lui soit dédiée.

Un laboratoire qui a besoin d'un réactif avec une ligne de base publiée approfondie choisit GHK‑Cu ; celui qui étudie l'analogue lui-même choisit AHK‑Cu, et commande généralement les deux pour les exécuter côte à côte.

Ce qu'un acheteur en retient : toute fiche qui décrit AHK‑Cu avec la littérature de GHK‑Cu emprunte. Les deux composés sont séparés par un groupe méthyle en structure et par quelques centaines d'articles en documentation.

Le catalogue propose les deux sous forme de poudres lyophilisées dans des flacons borosilicatés scellés de 3 mL avec septum bromobutyle et capsule sertie :

GHK‑Cu vient en flacons plus grands car il est produit à l'échelle industrielle et coûte moins cher par milligramme à fabriquer ; AHK‑Cu est une synthèse de plus petit volume et commence à 50 mg.

Les prix en vigueur, par flacon et par milligramme, figurent sur les deux pages produits, et les questions côté achat (vérifications du fournisseur, ce que le prix inclut) sont dans le guide d'achat GHK‑Cu et le guide d'achat AHK‑Cu.

« Copper peptide » sur une place de marché peut signifier l’un ou l’autre composé, un mélange des deux, le tripeptide sans cuivre, ou une crème contenant une fraction de pour cent de l’un d’eux.

Quatre questions règlent la question :

1. La séquence est-elle écrite ? Gly-His-Lys ou Ala-His-Lys. « Copper peptide » seul est une catégorie, pas un composé.
2. La masse sur le certificat est-elle la bonne ? 340.4 pour GHK, 354.4 pour AHK, sur un rapport d’un laboratoire nommé qui peut être consulté.
3. La poudre est-elle bleu-violet et la quantité indiquée en milligrammes ? Une poudre blanche n’est pas un complexe de cuivre ; une fiche en onces liquides est un cosmétique.
4. La page décrit-elle uniquement le réactif ? Composition, documentation de pureté, stockage, « usage recherche uniquement ». Une page qui décrit autre chose est une page qui peut être retirée avec une commande en transit.

La méthode complète en sept points se trouve dans comment vérifier un fournisseur de peptides.