Thymosin alpha-1 (Tα1) peptidi: sekvenssi, toimitustapa, COA, koot

Thymosin alpha-1 (Tα1) on 28 aminohapon peptidi, joka eristettiin ensimmäisen kerran vuonna 1977 vasikan kateenkorvasta Allan Goldsteinin ryhmän toimesta, joka oli fraktioinut kateenkorvauutteita vuosikymmenen ajan.

Myöhemmin kävi ilmi, että se on suuremman proteiinin, protymosiini alfan, N-terminaalinen fragmentti ja että siinä on asetyyliryhmä N-päässä, ominaisuus joka merkitsee todistuksessa.

Sama sekvenssi on tuotettu synteettisesti 1980-luvulta lähtien ja se on lisensoitu useissa maissa kauppanimellä Zadaxin.

Tutkimukseen myytävä thymosin alpha-1 on identtinen 28-tähteen asetyloitu peptidi, valmistettu kiinteäfaasisynteesillä, puhdistettu preparatiivisella HPLC:llä ja pakastekuivattu. Vain tutkimuskäyttöön. Ei ihmis- eikä eläinkäyttöön.

Kolme luettelonimeä sisältää sanan "thymosin" tai "thym-", ja ostajat pyytävät säännöllisesti yhtä tarkoittaen toista. Ne ovat kolme eri kohdetta.

Alfa- ja beetatymosiinit ovat toisiinsa liittymättömiä sekvenssejä, jotka sattumalta eristettiin saman kudoksen saman valmistuksen (tymosiinifraktio 5, vasikan kateenkorvauute joka valmistettiin ensimmäisen kerran 1960-luvulla) yhteydessä, mikä on ainoa syy miksi ne jakavat nimen.

Thymalin on raaka fraktio josta ne eristettiin.

Luettelo joka kuvaa thymosin alpha-1:stä TB‑500:n ominaisuuksilla tai joka antaa thymalinille yhden molekyylimassan on sekoittanut kolme. Seitsemäntähteen peptidillä on oma oppaansa: TB‑500 peptidi: sekvenssi, COA, koot.

Tymosin alfa-1:n N-terminaalinen seriini kantaa asetyyliryhmää (CH₃CO-), joka lisätään synteesin viimeisenä vaiheena hartsilla. Se muuttaa kolmea asiaa, jotka sertifikaatti raportoi.

• Massa. Asetyyli lisää 42,0 daltonia. "Tymosin alfa-1", jonka massa rekonstruoituu arvoon 3 066,3 eikä 3 108,3, ei ole koskaan asetyloitu ja on des-asetyylipeptidi, eri molekyyli.
• HPLC. Asetyloitu peptidi ei sisällä vapaata N-terminaalista amiinia, joten se eluoituu käänteisfaasissa hieman myöhemmin kuin des-asetyylimuoto. Epätäydellinen asetylointi näkyy pienenä piikkinä juuri ennen pääpiikkiä; hyvin valmistetussa erässä se on alle 0,5 %.
• Stabiilisuus. Ilman vapaata amiinia N-päässä peptidi ei ole substraatti aminopaptidaaseille eikä käy läpi N-terminaalisia sivureaktioita (diketopiperatsiinin muodostuminen), jotka lyhentävät joidenkin sekvenssien säilyvyyttä. Hyllyssä se on yksi paremmin käyttäytyvistä peptideistä kooltaan.

Sekvenssi ei sisällä metioniinia, kysteiinia tai tryptofaania, joten hapettuminen ei ole huolenaihe kuten sermorelin:n kohdalla.

Sen yhdeksän happamaa tähdettä tekevät siitä voimakkaan hygroskooppisen asetaattisuolana, minkä vuoksi suljettu fiola on tärkeämpi tälle peptidille kuin useimmille muille.

HPLC-puhtaus: yksi päähuippu

Käänteisfaasi-HPLC:ssä peptidi eluoituu yhtenä päähuippuna; puhtausluku on kyseisen huipun pinta-ala suhteessa kaikkiin huippuihin.

Yli 99 % on luettelolottien spesifikaatio.

Epäpuhtauksia, joita kannattaa tarkkailla, ovat des-asetyylipeptidi (eluoituu juuri ennen), synteesin deleetiojaksot (ketju, josta puuttuu yksi tähdettä) ja, peptidissä, jossa on näin monta glutamaatti- ja aspartaattitähdettä, aspartimidiin liittyvät sivutuotteet, jotka eluoituvat lähelle päähuippua.

Massaspektrometria: 3,108.3

Tämän kokoinen ja varautunut peptidi näkyy elektrospray-ionisaatiossa moninkertaisesti varautuneina ioneina, negatiivisessa moodissa yhtä helposti kuin positiivisessa; raportissa luetellaan havaitut ionit ja dekonvolutoitu massa.

Tymosiini alfa-1:lle odotetut arvot positiivisessa moodissa ovat suunnilleen m/z 1,037.1 [M+3H]³⁺:lle ja 778.1 [M+4H]⁴⁺:lle, molemmat rekonstruoituen arvoon 3,108.3. Dekonvolutoitu 3,066 on des-asetyylimuoto.

Nettopitoisuus, vesi, endotoksiini

Nettopitoisuus (aminohappoanalyysillä tai UV:llä) kertoo, kuinka moni merkitty milligramma on peptidiä; vain neljällä emäksisellä tähteellä asetaattivastaioneja kantamaan tyypillinen arvo tälle sekvenssille on 85–90 %, korkeampi kuin emäksiselle peptidille.

Vesi (Karl Fischer) on tyypillisesti 3–8 % lyofiloidussa kakussa ja nousee nopeasti avatussa fiolassa tämän hygroskooppisen suolan kanssa.

Endotoksiini (LAL, EU/mg) kertoo, olivatko täytön vesi ja lasitavara puhtaita.

Mitä muuta sivulla on oltava

• Laboratorion nimi ja todennettavissa oleva testinumero (Janoshik Analytical on viite tässä markkinassa).
• Eränumero, identtinen fiolaan painetun kanssa.
• Testipäivämäärä ja valokuva testatusta fiolasta toimittajan etiketti päällä. Todistus paljaasta valmistajan fiolasta ei kerro mitään valmiista tuotteesta.

OXpeptides-todistukset julkaistaan eräkohtaisesti COA-kirjastossa ja tymosiini alfa-1 -tuotesivulla kunkin erän palattua laboratoriosta. Kenttäkohtainen menetelmä on artikkelissa miten peptidin COA luetaan.

Thymosin alpha-1 on varastossa yhdessä koossa, 10 mg: 10 mg 3,1 kDa peptidiä on 3,2 mikromoolia.

Tämän sivun yläosassa olevan luettelokortin hinta on reaaliaikainen. Määräalennukset alkavat kahdesta fiolasta (−5 % alkaen 2, −8 % alkaen 3), ja tilaushinta koskee jokaista toimitusta.

OXpeptidesin hintaan sisältyy: sinetöity, merkitty fiola testatusta erästä, sen erän COA sekä korvaus jos lähetys katoaa tai vahingoittuu. Toimitetaan Ranskasta (EU), seurattuna: $19, ilmainen alkaen $150.

Katso thymosin alpha-1 luettelossa →

• Lämpötila: −20 °C pitkäaikaissäilytykseen; jääkaappi (2–8 °C) muutamaksi viikoksi.
• Kosteus: tämän peptidin kohdalla huomioitava asia. Yhdeksän happamaa tähdettä tekevät asetaattisuolasta voimakkaan hygroskooppisen; pidä fiola suljettuna ja laatikossaan, ja anna kylmän fiolan saavuttaa huoneenlämpötila ennen kuin se poistetaan pussistaan, jotta lasiin ei kondensoidu vettä.
• Valo ja happi: sekvenssissä ei ole hapettuvia tähteitä; tavallinen suljettu laatikko riittää.
• Säilyvyysaika: 24 kuukautta kylmässä säilytetylle suljetulle lyofiloidulle fiolalle; etiketin päivämäärä määrää.

Muutama päivä ympäristön lämpötilassa tapahtuvaa lähetystä ei heikennä suljettua jauhetta. Yhdistekohtaiset säännöt löytyvät lyofiloidut peptidit: säilytys ja säilyvyysaika.

"Thymosin alpha 1" palauttaa ensyklopediasivuja, journal-artikkeleita ja klinikoita ennen kuin se palauttaa tutkimustoimittajan.

Laboratoriolle, joka tarvitsee reagenssia, listauksella, jolla on merkitystä, vastataan viiteen kysymykseen sivulla itsessään.

1. Onko se oikea molekyyli? 28 tähdettä, asetyloitu, 3,108.3 g/mol. Ei TB‑500 (889), ei thymalin (seos).
2. Onko eräkohtainen COA nimeltä mainitulta riippumattomalta laboratoriolta, todennettavissa laboratorion sivustolla, HPLC-puhtaudella, massalla 3,108.3 ja nettopeptidipitoisuudella?
3. Näyttääkö COA toimittajan omalla merkityllä fiolalla, ja vastaako sen eränumero saamaasi fiolaa?
4. Lähetetäänkö fiola kotimaan varastosta, seurattuna, muutamassa päivässä? Luettelo lähetetään Ranskasta Eurooppaan.
5. Kuvaileeko sivu vain reagenssia (sekvenssi, puhtausdokumentaatio, säilytys), "Vain tutkimuskäyttöön. Ei ihmis- eikä eläinkäyttöön." todettuna selkeästi? Toimittaja, joka julkaisee käyttösisältöä, on toimittaja, joka on helppo sulkea, ja riski kohdistuu ostajaan, jonka paketti on kuljetuksessa.

Seitsemän pisteen menetelmä on artikkelissa kuinka tarkistaa peptiditoimittaja; Yhdysvaltojen laajuinen tarkistuslista artikkelissa missä ostaa tutkimuspeptidejä Yhdysvalloissa.