Thymosin alpha-1 (Tα1) peptiid: järjestus, kuidas see tarnitakse, COA, suurused

Thymosin alpha-1 (Tα1) on 28 aminohappe peptiid, mis eraldati esmakordselt 1977. aastal vasika tüümusest Allan Goldsteini rühma poolt, kes oli kümme aastat tüümuse ekstrakte fraktsioneerinud.

Hiljem selgus, et see on suurema valgu prothymosin alpha N-terminaalne fragment ning kannab atsetüülrühma N-terminaalis, mis on sertifikaadil oluline tunnus.

Sama järjestust on sünteesitud alates 1980. aastatest ning see on litsentsitud mitmes riigis kaubanime Zadaxin all.

Teadusuuringuteks müüdav thymosin alpha-1 on identne 28-jäägiline atsetüülitud peptiid, mis on valmistatud tahkefaasilise sünteesi teel, puhastatud preparatiivse HPLC-ga ja lüofiliseeritud. Ainult teadusuuringuteks.

Ei ole mõeldud inimestele ega veterinaarseks kasutamiseks.

Kolme kataloogikirje nimes esineb sõna "thymosin" või "thym-", ning ostjad küsivad sageli üht, mõeldes teist. Need on kolm erinevat objekti.

Alfa- ja beeta-tümosiinid on mitteseotud järjestused, mis eraldati samast koe preparaadist (thymosin fraction 5, vasika tüümuse ekstrakt, mis valmistati esmakordselt 1960. aastatel); see on ainus põhjus, miks nad nime jagavad.

Thymalin on toores fraktsioon, millest nad eraldati.

Kirje, mis kirjeldab thymosin alpha-1 TB‑500 omadustega või annab thymalinile ühe molekulmassi, on need kolm segi ajanud. Seitsmejäägilise peptiidi juhend on eraldi: TB‑500 peptiid: järjestus, COA, suurused.

Thymosin alpha-1 N-terminaalne seriin kannab atsetüülrühma (CH₃CO-), mis lisatakse sünteesi viimase etapina vaigul. See muudab kolme asja, mida sertifikaat kajastab.

• Mass. Atsetüül lisab 42,0 daltonit. "Thymosin alpha-1", mille mass rekonstrueerub 3 066,3 asemel 3 108,3, ei olnud kunagi atsetüülitud ja on des-atsetüülpeptiid, teistsugune molekul.
• HPLC. Atsetüülitud peptiidil puudub vaba N-terminaalne amiin, mistõttu see elueerub pöördfaasis veidi hiljem kui des-atsetüülvorm. Mittetäielik atsetüülimine ilmneb väikese piigina vahetult enne peamist; hästi valmistatud partiil jääb see alla 0,5 %.
• Stabiilsus. Ilma vaba amiinita N-terminaalis ei ole peptiid aminopeptidaaside substraadiks ega läbi N-terminaalseid kõrvalreaktsioone (diketo-piperasiini moodustumine), mis lühendavad mõne järjestuse säilivusaega. Riiulil on see oma suurusega peptiidide seas paremini käituv.

Järjestus ei sisalda metioniini, tsüsteiini ega trüptofaani, mistõttu oksüdatsioon ei ole probleemiks nagu sermorelin puhul. Üheksa happelist jääki muudavad selle atsetaatsoolana tugevalt hügroskoopsemaks, mistõttu suletud viaal on selle peptiidi puhul olulisem kui enamiku teiste puhul.

HPLC puhtus: üks peamine piik

Pöördfaasilises HPLC-s elueerub peptiid ühe peamise piigina; puhtuse näitaja on selle piigi pindala kõigi piikide suhtes. Üle 99 % on kataloogipartiide spetsifikatsioon.

Otsitavad lisandid on des-atsetüülpeptiid (elueerub vahetult enne), sünteesi käigus tekkinud deletsioonijärjestused (ühe jäägi puudumine) ning nii paljude glutamaadi ja aspartaadi jääkidega peptiidi puhul aspartimiidiga seotud kõrvalsaadused, mis elueeruvad peamise piigi lähedal.

Massispektromeetria: 3 108,3

Sellise suuruse ja laenguga peptiidi nähakse elektrospreijoniseerimisel mitmekordselt laetud ioonidena, negatiivses režiimis sama hõlpsalt kui positiivses; aruanne loetleb täheldatud ioonid ja dekonvolueeritud massi.

Thymosin alpha-1 puhul on positiivses režiimis oodatud väärtused ligikaudu m/z 1 037,1 [M+3H]³⁺ ja 778,1 [M+4H]⁴⁺, mõlemad rekonstrueeruvad 3 108,3-ks. Dekonvolueeritud 3 066 on des-atsetüülvorm.

Netopeptiidi sisaldus, vesi, endotoksiin

Netosisaldus (aminohappeanalüüsi või UV abil) näitab, mitu milligrammi märgitud milligrammidest on peptiid; ainult nelja aluselise jäägiga atsetaadi vastuioonide kandmiseks on 85–90 % tüüpiline selle järjestuse puhul, kõrgem kui aluselise peptiidi puhul.

Vesi (Karl Fischer) on lüofiliseeritud koogis tavaliselt 3–8 % ja tõuseb kiiresti selle hügroskoopses soolas avatud viaalis. Endotoksiin (LAL, EU/mg) näitab, kas täitevesi ja klaasnõud olid puhtad.

Mida veel lehel peab olema

• Labori nimi ja kontrollitav testnumber (Janoshik Analytical on selles turusegmendis viide).
• Partii number, identne viaalile trükituga.
• Testimise kuupäev ja fotograafia testitud viaalist, millel on tarnija etikett. Sertifikaat palja tootja viaali kohta ei ütle midagi valmis toote kohta.

OXpeptides sertifikaadid avaldatakse iga partii kohta COA teegis ja thymosin alpha-1 tootelehel, kui iga partii laborist tagasi saabub. Välja-välja meetod on kirjeldatud kuidas lugeda peptiidi COA-d.

Thymosin alpha-1 on laos ühes suuruses, 10 mg: 10 mg 3,1 kDa peptiidi on 3,2 mikromooli.

Selle lehe ülaosas olev kataloogikaart näitab kehtivat hinda. Mahusoodustused kehtivad alates kahest viaalist (−5 % alates 2, −8 % alates 3) ning tellimushind kehtib igale tarnele.

Mida hind OXpeptidesis sisaldab: suletud, etikettidega viaal testitud partiist, selle partii COA ning asendus, kui pakk saadetise käigus kaob või kahjustub. Laevatatakse Prantsusmaalt (EL), jälgitav: $19, tasuta alates $150.

Vaata thymosin alpha-1 kataloogis →

• Temperatuur: −20 °C pikaajaliseks säilitamiseks; külmkapp (2–8 °C) mõneks nädalaks.
• Niiskus: selle peptiidi puhul jälgitav punkt. Üheksa happelist jääki muudavad atsetaatsola tugevalt hügroskoopsemaks; hoidke viaal suletuna ja karbis ning laske külmal viaalil enne kotist välja võtmist toatemperatuurini jõuda, et klaasile ei kondenseeruks vett.
• Valgus ja hapnik: järjestuses ei ole oksüdeeruvaid jääke; tavaline suletud kast on piisav.
• Säilivusaeg: 24 kuud suletud lüofiliseeritud viaali puhul külmas säilitamisel; etiketil olev kuupäev kehtib.

Mõnepäevane ümbritseva keskkonna temperatuuriga transport ei lagunda suletud pulbrit. Ühendipõhised reeglid on kirjeldatud lüofiliseeritud peptiidid: säilitamine ja säilivusaeg.

"Thymosin alpha 1" tagastab entsüklopeedilisi lehti, ajakirjaartikleid ja kliinikuid enne teadustarnijat. Laborile, kes vajab reagenti, on oluline kirje, mis vastab lehel endal viiele küsimusele.

1. Kas see on õige molekul? 28 jääki, atsetüülitud, 3 108,3 g/mol. Ei ole TB‑500 (889), ei ole thymalin (segu).
2. Kas on partii COA nimetatud sõltumatust laborist, kontrollitav labori saidil, HPLC puhtuse, massiga 3 108,3 ja netopeptiidi sisaldusega?
3. Kas COA näitab tarnija enda etikettidega viaali ning kas selle partii number vastab saadavale viaalile?
4. Kas viaal saadetakse kodumaisest laost, jälgitavalt, mõne päevaga? Kataloog saadab Prantsusmaalt Euroopasse.
5. Kas leht kirjeldab ainult reagenti (järjestus, puhtuse dokumentatsioon, säilitamine), koos selgelt öeldud "ainult teadusuuringuteks"? Tarnija, kes avaldab kasutusinfot, on tarnija, keda on lihtne sulgeda, ja see risk langeb ostjale, kelle pakk on teel.

Seitsmepunktiline meetod on kuidas kontrollida peptiiditarnijat; USA-sisene kontrollnimekiri kus osta teaduspeptiide USA-s.