GHK‑Cu vs AHK‑Cu: de to kobbertripeptider sammenlignet, atom for atom

Stiller man de to sekvenser op, er forskellen et enkelt kulstofatom.

• GHK = glycyl-L-histidyl-L-lysin. Glycin, den første rest, har et hydrogen som sidekæde.
• AHK = L-alanyl-L-histidyl-L-lysin. Alanin har en methylgruppe (CH₃), hvor glycin har et hydrogen.

Den methylgruppe tilføjer 14 Da (CH₂) til massen og indfører et kiralcenter ved den første rest.

Alt andet er identisk: histidinen i midten, hvis imidazolring binder kobber, og lysinen til sidst. Hvert tripeptid kompleksbindes derefter med én kobber(II)-ion for at give GHK‑Cu og AHK‑Cu.

GHK blev isoleret fra plasma i 1973 af Loren Pickart, hvilket er grunden til, at det har halvtreds års kemi bag sig.

AHK er et syntetisk analog, der dukkede op i kosmetik-ingredienslitteraturen i 2000'erne. Begge fremstilles i dag ved fastfase-syntese; ingen udvindes fra noget. Kun til forskningsbrug. Ikke til human eller veterinær brug.

Kobberindholdslinjen er værd at se på en gang til. I begge komplekser udgør et enkelt kobberatom (63.5 g/mol) omkring en sjettedel af massen.

Et "100 mg GHK‑Cu" hætteglas indeholder derfor omkring 16 mg kobber og 84 mg peptid; en liste der angiver massen af det kobberfrie tripeptid for et kobberkompleks har talt forkert med 16 %.

Kobber(II)-ionen i GHK‑Cu bindes af tre atomer i peptidet: nitrogenet i den N-terminale amin (på glycin), det deprotonerede nitrogen i den første peptidbinding og et nitrogen i histidin-imidazolringen.

En fjerde plads på kobberet optages af vand eller, ved højere koncentration, af et andet GHK-molekyle.

Geometrien er kvadratisk-plan omkring kobberet, hvilket er arrangementet der giver kobber(II)-peptidkomplekser deres blå-violette farve.

AHK‑Cu binder kobber gennem de samme tre nitrogenatomer.

Methylgruppen fra alanin sidder på carbonet ved siden af den N-terminale amin, uden for koordinationsplanet, så den ændrer kobberets umiddelbare miljø uden at ændre hvilke atomer der binder det. To konsekvenser kan måles:

• Farven er den samme. Begge pulvere er blå-violette, begge opløsninger er blå. Intet på en bænk skelner dem med øjet.
• Massen er forskellig. På et massespektrum optræder de frie tripeptidioner ved 341.2 (GHK, M+H⁺) og 355.2 (AHK, M+H⁺); kobberet dissocierer under den sædvanlige ionisering, så certifikatet rapporterer peptidmassen, og 14 Da-forskellen er identitetskontrollen.

Begge komplekser er stabile som tørre faste stoffer men følsomme over for oxygen og lys over længere perioder i opløsning, hvilket er grunden til at opbevaringslinjen på begge katalogposter tilføjer "oxygen" til det sædvanlige "lys og fugt".

Da de to ser identiske ud, er analysescertifikatet det eneste dokument, der fortæller en køber, hvilken der er i hætteglasset. Tre linjer udfører arbejdet.

Retentionstid

På en omvendt-fase HPLC-søjle gør den ekstra methylgruppe AHK en smule mere hydrofob, så AHK‑Cu eluerer en lille smule senere end GHK‑Cu under samme gradient.

Alene er forskydningen for lille til at identificere en forbindelse; den bliver nyttig, når laboratoriet har kørt begge standarder, og det er grunden til, at en leverandør, der lister begge, skal vise et separat kromatogram for hver.

Massebekræftelse

Den afgørende linje. En observeret masse på 340,4 (eller en M+H⁺ på 341,2) betyder GHK; 354,4 (M+H⁺ på 355,2) betyder AHK.

Et certifikat, der viser GHK-massen på et AHK‑Cu-hætteglas, har testet den forkerte forbindelse, eller hætteglasset indeholder den forkerte forbindelse.

Kobberanalyse

De bedste certifikater tilføjer en kobberbestemmelse (ved ICP eller en kolorimetrisk metode) og rapporterer den mod de teoretiske 15 til 16 %.

En kobberværdi langt under det betyder, at hætteglasset indeholder det frie tripeptid eller et kompleks fremstillet med for lidt kobber, og den blå farve vil være svagere end forventet.

Få laboratorier inkluderer denne linje som standard; bed om den ved en stor ordre.

OXpeptides-certifikaterne offentliggøres pr. lot i COA-biblioteket.

De resterende felter (laboratorium, verificerbart testnummer, lot, dato, foto af det mærkede hætteglas) er de samme for hvert peptid og læses i sådan læser du et peptid-COA; hvad HPLC-procentdelen siger og ikke siger, findes i HPLC-renhed: hvad 99 % betyder.

Dette er den største praktiske forskel mellem de to reagenser, og det er en kendsgerning om dokumentation, ikke om molekylerne.

GHK‑Cu er blevet karakteriseret siden 1973.

Dets krystalstruktur, dets kobberbindingskonstanter, dets opførsel i dyrkede cellemodeller og i genekspressionsskærme (Broad Institute Connectivity Map, hvor det optræder ved navn) er publiceret, gennemgået og gennemgået igen.

Pickart og Margolinas 2018-review, listet nedenfor, er det standardindgangspunkt.

AHK‑Cu har et lille antal primære artikler, de fleste fra kosmetik-ingredienssiden og de fleste i dyrkede cellemodeller, hvoraf Shin et al. (2019) er den, der studerer det ved navn side om side med GHK‑Cu.

Der findes ingen dedikeret review. Et laboratorium, der har brug for et reagens med en dyb publiceret baseline, vælger GHK‑Cu; et, der studerer analoget selv, vælger AHK‑Cu og bestiller normalt begge for at køre dem side om side.

Hvad en køber tager med sig fra det: enhver liste, der beskriver AHK‑Cu med GHK‑Cu's litteratur, låner. De to forbindelser er én methylgruppe fra hinanden i struktur og et par hundrede artikler fra hinanden i dokumentation.

Kataloget tilbyder begge som lyofiliserede pulvere i forseglede 3 mL borosilikat-hætteglas med bromobutyl-septum og krympekrone:

GHK‑Cu kommer i større hætteglas fordi det produceres i industriel skala og koster mindre pr. milligram at fremstille; AHK‑Cu er en syntese i mindre volumen og starter ved 50 mg.

De aktuelle priser, pr. hætteglas og pr. milligram, står på de to produktsider, og købsrelaterede spørgsmål (leverandørkontroller, hvad prisen inkluderer) findes i the GHK‑Cu buying guide og the AHK‑Cu buying guide.

"Copper peptide" på et marked kan betyde enten forbindelse, en blanding af de to, det kobberfrie tripeptid eller en creme indeholdende en brøkdel af en procent af en af dem. Fire spørgsmål afgør det:

1. Er sekvensen skrevet ud? Gly-His-Lys eller Ala-His-Lys. "Copper peptide" alene er en kategori, ikke en forbindelse.
2. Er massen på certifikatet den rigtige? 340.4 for GHK, 354.4 for AHK, på en rapport fra et navngivet laboratorium der kan slås op.
3. Er pulveret blå-violet, og er mængden angivet i milligram? Et hvidt pulver er ikke et kobberkompleks; en liste i fluid ounces er et kosmetisk produkt.
4. Beskriver siden kun reagenset? Sammensætning, renhedsdokumentation, opbevaring, "Kun til forskningsbrug. Ikke til human eller veterinær brug.". En side der beskriver andet er en side der kan tages ned med en ordre i transit.

Den fulde syv-punkts metode er i hvordan man kontrollerer en peptidleverandør.