GHK‑Cu vs AHK‑Cu: dva měďnaté tripeptidy porovnány atom po atomu

Seřadíme-li obě sekvence vedle sebe, rozdíl je jediný uhlík.

• GHK = glycyl-L-histidyl-L-lysin. Glycin, první zbytek, má jako postranní řetězec vodík.
• AHK = L-alanyl-L-histidyl-L-lysin. Alanin má methylovou skupinu (CH₃) tam, kde glycin má vodík.

Tato methylová skupina přidává 14 Da (CH₂) k hmotnosti a zavádí chirální centrum na prvním zbytku.

Vše ostatní je shodné: histidin uprostřed, jehož imidazolový kruh váže měď, a lysin na konci. Každý tripeptid je poté komplexován s jedním iontem mědi(II), čímž vzniká GHK‑Cu a AHK‑Cu.

GHK byl izolován z plazmy v roce 1973 Lorenem Pickartem, proto má za sebou padesát let chemie.

AHK je syntetický analog, který se objevil v literatuře kosmetických složek v 2000. letech. Oba se dnes vyrábějí pevnofázovou syntézou; ani jeden se neextrahuje z ničeho. Pouze k výzkumu.

Není určeno k lidskému ani veterinárnímu použití.

Řádek o obsahu mědi stojí za druhý pohled. V obou komplexech představuje jeden atom mědi (63.5 g/mol) přibližně jednu šestinu hmotnosti.

Vialka „100 mg GHK‑Cu“ proto obsahuje přibližně 16 mg mědi a 84 mg peptidu; výpis, který uvádí hmotnost tripeptidu bez mědi pro měďnatý komplex, se mýlí o 16 %.

Ion mědi(II) v GHK‑Cu je vázán třemi atomy peptidu: dusíkem N-terminální aminoskupiny (na glycinu), deprotonovaným dusíkem první peptidové vazby a dusíkem imidazolového kruhu histidinu. Čtvrté místo na mědi obsazuje voda nebo při vyšší koncentraci druhá molekula GHK.

Geometrie je čtvercově planární kolem mědi, což je uspořádání, které dává komplexům mědi(II) s peptidy jejich modrofialovou barvu.

AHK‑Cu váže měď stejnými třemi dusíky.

Methylová skupina alaninu sedí na uhlíku vedle N-terminální aminoskupiny, mimo koordinační rovinu, takže mění bezprostřední okolí mědi, aniž by měnila, které atomy ho vážou. Dvě důsledky jsou měřitelné:

• Barva je stejná. Oba prášky jsou modrofialové, oba roztoky modré. Nic na lavici je nelze odlišit okem.
• Hmotnost je odlišná. Na hmotnostním spektru se ionty volných tripeptidů objevují na 341.2 (GHK, M+H⁺) a 355.2 (AHK, M+H⁺); měď se za obvyklé ionizace disociuje, proto certifikát uvádí hmotnost peptidu a mezera 14 Da je kontrolou identity.

Oba komplexy jsou stabilní jako suché pevné látky, ale citlivé na kyslík a světlo při dlouhodobém skladování v roztoku, proto řádek skladování v obou položkách katalogu přidává „kyslík“ k obvyklým „světlo a vlhkost“.

Protože oba vypadají identicky, certifikát analýzy je jediný dokument, který kupujícímu řekne, který je ve vialce. Tři řádky to udělají.

Doba retence

Na reverzně-fázové HPLC koloně činí extra methylová skupina AHK mírně hydrofobnější, takže AHK‑Cu eluuje o něco později než GHK‑Cu při stejném gradientu.

Samo o sobě je toto posunutí příliš malé na identifikaci sloučeniny; stává se užitečným, když laboratoř změřila oba standardy, a je důvodem, proč dodavatel, který nabízí oba, musí ukázat samostatný chromatogram pro každý.

Potvrzení hmotnosti

Rozhodující řádek. Pozorovaná hmotnost odpovídající 340.4 (nebo M+H⁺ na 341.2) znamená GHK; 354.4 (M+H⁺ na 355.2) znamená AHK.

Certifikát, který ukazuje hmotnost GHK na vialce AHK‑Cu, otestoval špatnou sloučeninu nebo vialka obsahuje špatnou sloučeninu.

Stanovení mědi

Nejlepší certifikáty přidávají stanovení mědi (ICP nebo kolorimetrickou metodou) a uvádějí ho proti teoretickým 15 až 16 %.

Hodnota mědi výrazně pod touto hodnotou znamená, že vialka obsahuje volný tripeptid nebo komplex vyrobený s příliš malým množstvím mědi a modrá barva bude slabší, než se očekává.

Jen málo laboratoří tento řádek standardně zahrnuje; vyžádejte si ho při velké objednávce.

Certifikáty OXpeptides jsou zveřejňovány podle šarže v knihovně COA.

Zbývající pole (laboratoř, ověřitelné číslo testu, šarže, datum, foto označené vialky) jsou stejná pro každý peptid a čtou se v jak číst COA peptidu; co procento HPLC říká a neříká, je v HPLC čistota: co znamená 99 %.

Toto je největší praktický rozdíl mezi těmito dvěma reagenty a je to fakt o dokumentaci, nikoli o molekulách.

GHK‑Cu je charakterizován od roku 1973.

Jeho krystalová struktura, konstanty vazby mědi, chování v modelech kultivovaných buněk a v obrazovkách genové exprese (Connectivity Map Broadova institutu, kde se objevuje pod jménem) jsou publikovány, recenzovány a znovu recenzovány.

Přehled Pickarta a Margolinové z roku 2018, uvedený níže, je standardním vstupním bodem.

AHK‑Cu má několik primárních prací, většinou z oblasti kosmetických složek a většinou v modelech kultivovaných buněk, z nichž Shin et al. (2019) je ta, která ho studuje jménem vedle GHK‑Cu.

Neexistuje žádný přehled věnovaný jemu. Laboratoř, která potřebuje reagent s hlubokým publikovaným základem, volí GHK‑Cu; ta, která studuje samotný analog, volí AHK‑Cu a obvykle objednává oba, aby je mohla porovnat vedle sebe.

Co z toho kupující vyvodí: jakýkoli výpis, který popisuje AHK‑Cu literaturou GHK‑Cu, si vypůjčuje. Tyto dvě sloučeniny jsou v struktuře jedna methylová skupina od sebe a v dokumentaci několik set prací.

Katalog nabízí oba jako lyofilizované prášky v uzavřených 3 mL borosilikátových vialkách s bromobutylovým septum a krimpovacím uzávěrem:

GHK‑Cu přichází ve větších vialkách, protože se vyrábí v průmyslovém měřítku a stojí méně na miligram; AHK‑Cu je syntéza menšího objemu a začíná na 50 mg.

Aktuální ceny, za vialku i na miligram, jsou na dvou stránkách produktů a otázky z pohledu nákupu (kontroly dodavatele, co cena zahrnuje) jsou v průvodci nákupu GHK‑Cu a průvodci nákupu AHK‑Cu.

„Měďnatý peptid“ na tržišti může znamenat buď sloučeninu, směs obou, tripeptid bez mědi nebo krém obsahující zlomek procenta jednoho z nich. Čtyři otázky to vyřeší:

1. Je sekvence vypsána? Gly-His-Lys nebo Ala-His-Lys. „Měďnatý peptid“ sám o sobě je kategorie, nikoli sloučenina.
2. Je hmotnost na certifikátu ta správná? 340.4 pro GHK, 354.4 pro AHK, na zprávě z pojmenované laboratoře, kterou lze dohledat.
3. Je prášek modrofialový a je množství uvedeno v miligramech? Bílý prášek není měďnatý komplex; výpis ve fluidních uncích je kosmetika.
4. Popisuje stránka pouze reagent? Složení, dokumentace čistoty, skladování, „pouze k výzkumu“. Stránka, která popisuje cokoli jiného, je stránka, kterou lze stáhnout s objednávkou v přepravě.

Úplná sedmibodová metoda je v jak zkontrolovat dodavatele peptidů.